生物化学第15章 基因表达调控20111119PPT.ppt

乳糖操纵子的正调控工作原理: P Z Y A 启动子 分解代谢乳糖的三种酶基因 O 操纵基因 调控区 结构基因 CAP 变构 CAP变构激活 cAMP CAP 乳糖操纵子 CAP位点 (Catabolite Activator Protein site) CAP CAP: 代谢物激活蛋白 乳糖操纵子的正调控工作原理： 细菌优先利用葡萄糖作为能源 有葡萄糖： cAMP CAP无活性 不促进转录 无葡萄糖： cAMP CAP有活性 促进转录 乳糖操纵子调控方式的比较 负调控 正调控 调节蛋白 阻遏蛋白 CAP 变构物 乳糖，半乳糖 cAMP 与变构物结合 无活性 有活性 基因位点 O基因 CAP位点 结合于基因位点 基因关闭 基因开放 协调调节 ※当阻遏蛋白封闭转录时，CAP对该系统不能发挥作用； ※ 如无CAP存在，即使没有阻遏蛋白与操纵序列结合，操纵子仍无转录活性。 单纯乳糖存在时，细菌利用乳糖作碳源； 若有葡萄糖或葡萄糖/乳糖共同存在时 , 细菌首先利用葡萄糖。 葡萄糖对 lac 操纵子的阻遏作用称分解代谢阻遏（catabolic repression）。 三、色氨酸操纵子的工作原理： 1. 阻遏物介导的负调控（主要） trpE trpC Trp 阻遏 蛋白基因 启动子 操纵 基因 前导序列 （leader） 衰减子（attenuator） 色氨酸生物合成 酶系基因 trpD Trp阻 遏蛋白 色氨酸 变构 Trp阻遏 蛋白 有活性 Trp阻遏 蛋白 色氨酸 无活性 Trp阻 遏蛋白 体现节省原则 三、色氨酸操纵子的工作原理： 2.衰减子介导的负调控 原核生物转录终止的种类： （1） 依赖ρ因子的转录终止 ρ因子与新合成的RNA单链poly C结合，促进转录产物从转录复合物中释放出来，终止转录。 依赖ρ因子 不依赖ρ因子 （2） 不依赖ρ因子的转录终止 转录产物形成富含GC 配对的发夹结构及其后面富含UA配对的序列，使RNA聚合酶失活，并使新合成的RNA易从转录复合物中释放出来，终止转录。 U A U 5’ – UAUCCACA G G C C G C G C C G C G G C U A C C G C AUAUAUUAUUUUUUU - 3’ G trpE 前导序列 （leader） 衰减子（attenuator） 序列 1 序列 2 序列 3 序列 4 序 列 2 序 列 3 序 列 3 序 列 4 AUAUUAUUUUUUU 序列 1 两个相邻的色氨酸密码子 衰减子结构 序 列 2 序 列 3 1 细菌内色氨酸（trp）缺乏时 核糖体 序列4 核糖体停留在 序列1色氨酸 密码子处 序列2和3 配对形成 发夹结构 序列3和4 无法形成 衰减子结构 继续转录 合成trp的 mRNA trp结构基因 细菌内色氨酸（trp）充足时 核糖体 核糖体占 据序列1和 序列2 序列3和4 形成 衰减子结构 转录 终止！ 核糖体顺利通 过序列1色氨 酸密码子处 序列2 序 列 3 序 列 4 AUAUUAUUUUUUU 第四节 真核生物基因表达的调控 一、真核基因组结构特点 1.真核基因组结构庞大，C值矛盾 2. 单顺反子 3. 重复序列：106、103～4、单拷贝 4. 基因不连续性 人类：30亿bp 一个编码基因转录生成条mRNA，经翻译生成一条多肽链。 外显子被内含子分隔 二 、 真核生物基因表达调控的特点 （三）RNA聚合酶 （一）活性染色体结构变化 （二）正性调节占主导 （四）转录与翻译分隔进行 （五）转录后修饰、加工 对核酸酶敏感性提高 DNA拓扑结构变化 DNA碱基修饰变化 组蛋白的修饰变化 种类 转录产物 RNA聚合酶 Ⅰ RNA聚合酶 Ⅱ RNA聚合酶 Ⅲ 45S rRNA hnRNA，snRNA 5S rRNA、tRNA 、snRNA 45S是18S、5.8S和28S rRNA的前体 真核细胞的RNA聚合酶 RNA聚合酶 Ⅱ催化转录的基因称为Ⅱ类基因 染色质结构与基因表达 与DNA的 结合能力 下降 基因的 转录活性 DNA去甲基化、 增强子和某 些蛋白质因子 染色质 结构松散 基因的 转录活性