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宝曲对家兔实验性动脉粥样硬化影响研究 　　【摘要】 目的 观察宝曲对兔实验性动脉粥样硬化的治疗作用。方法 将健康的日本大耳白兔24只，随机分为空白对照组、模型对照组、宝曲组各8只。空白对照组：普通饲料喂养；模型对照组：高脂饲料(普通饲料+10 g/L胆固醇+80 g/L猪油)喂养；宝曲A组：高脂饲料喂养共喂养5周，给药7周。于给药7周末观察各组家兔主动脉组织病理学改变并观察其病变治标。结果 空白组无内膜增厚和脂质沉积；高脂组内膜增厚最显著，斑块内酯增加，含大量泡沫细胞；宝曲组给药前后个数据差值与模型组比较差异显著均有统计学意义。 　　【关键词】 动脉粥样硬化;宝曲 　　动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是危害人类健康最常见的一种疾病，累及冠状动脉、脑动脉及肢体动脉，后果严重。近年来大量研究表明宝曲在调节血脂、抗氧化保护血管内皮细胞等方面发挥着重要的作用。本实验旨在通过宝曲对兔动脉硬化形成的影响，分析其抗动脉粥样硬化的作用途径。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 ①实验动物:健康的日本大耳兔24只，雌雄各半，兔龄4个月，由北京科宇动物养殖中心提供(许可证号：SCXK京20100003)。②药品与试剂:宝曲由上海德丰堂生物科技有限公司生产，批号总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)检测试剂盒由上海名典生物工程有限公司提供；高密度脂蛋白(HDL)检测试剂盒由波音特生物科技有限公司提供；其他试剂均为分析纯。③主要仪器:7170全自动生化分析仪(日立公司)。 　　1.2 方法 ①动物饲养环境:分笼开放饲养，普通兔饲料和高脂兔饲料(普通饲料+10 g/L胆固醇+80 g/L猪油)均由北京科奥协力饲料有限公司提供。②动物分组及模型建立:普通饲料适应性喂养1周后，随机分为3组，各8只。空白组给予普通饲料加蒸馏水喂养；模型对照组给予高脂饲料加蒸馏水喂养；宝曲量组给予高脂饲料加蒸馏水喂养。除空白对照组外，其余各组给予兔耳中动脉部一次性注射牛血清白蛋白(250 mg/kg)，使动脉发生免疫损伤，5周后形成类似人的动脉粥样硬化病变。③给药方法:宝曲组给予87.2 mg/kg，灌胃容量2 ml/kg，1次/d。高脂组、空白组每日给与相同剂量蒸馏水一次，试验周期为7周。 　　1.3 观测??标及方法 　　1.3.1 血脂测定 喂饲12周后，各兔禁食12 h后，于各组兔耳缘静脉取血分离血清，按试剂盒方法测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)。 　　1.3.2 主动脉的病理学检查 ①动脉粥样斑块面积、斑块指数的测算:空气栓塞法处死实验动物，取部分颈动脉，包埋做切片，观察动脉粥样斑块；从主动脉弓到腹主动脉髂前分叉处取下主动脉，生理盐水洗净后苏丹染色，数码相机照相，输入计算机用Adobe illustrator图片处理软件测算斑块面积。于10×10倍光学显微镜下观察主动脉壁形态，并用测微尺测量斑块厚度及主动脉壁厚度，计算斑块指数(斑块指数=斑块面积 斑块厚度)。②内膜厚度与中膜厚度比值的测算:在10×10倍放大条件下，用1／10目镜测微尺测量动脉内膜厚度及中膜厚度。以内膜最厚处为中心，测量该点的内膜厚度及中膜厚度，算出其比值，然后将动脉等距分成5点(包括中心点)，分别测其比值，取该样本的平均值。③动脉内膜单位面积内泡沫细胞数(内膜泡沫细胞密度):在40×10倍放大条件下，用目镜测微尺及手控计数器分别计算上述5个点，25个小格内的泡沫细胞数，取该动物全部切片的平均值，算出每mm2内的泡沫细胞数，即为该动脉内膜单位面积内的泡沫细胞数。 　　2 结果 　　2.1 宝曲对血脂的影响 结果表明，给予高脂饲料12周后，模型组兔空腹血清TC、TG较空白组显著升高，而HDLC值明显降低。但在相同饲养条件下，给予宝曲组兔的空腹血脂变化和高脂组相比表现为TC、TG显著降低，HDLC显著升高，见表1。 　　2.2 主动脉形态学变化空白组主动脉内膜等结构完整，内皮下无脂质沉淀或斑块形成；模型组与空白组比较内膜增厚，内膜厚度/中膜厚度比值显著增加，同时形成明显的粥样斑块，可见大量泡沫细胞，严重者泡沫细胞崩解，胆固醇结晶形成；宝曲组的内膜增厚程度及结缔组织成分与模型组比较均显著减轻，泡沫细胞也少于模型组。表明宝曲据有减轻主动脉AS形成的作用。 　　3 讨论 　　现代医学研究表明，血管内皮细胞损伤是动脉粥样硬化形成的始动环节，两者又相互影响,兼顾这两种致病因素是非常必要的。近年研究表明血管壁内中膜厚度(IMT)是AS的早期改变，斑块形成是AS的明显特征，它可反应AS的程度［1］。在动脉粥样硬化形成过程中，由于单核细胞和平滑肌细胞迁移、黏附、增生，并形成泡沫细胞。泡沫细胞崩解后释放出的脂质形成脂质核心，从而使病