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念珠菌引起泌尿系统感染耐药状况分析
念珠菌引起泌尿系统感染耐药状况分析
【摘要】 目的 了解念珠菌引起泌尿系感染的地位及其耐药性。方法 采用VITEK32的UID3卡和YBC卡进行细菌的计数及鉴定;用纸片扩散法进行念珠菌的药物敏感性实验。结果 在念珠菌引起泌尿系感染中,白念珠菌所占比例最高,其次为光滑念珠菌。白念珠菌和热带念珠菌对氟康唑的敏感性为100%,光滑念珠菌对氟康唑为浓度依赖性敏感,克柔念珠菌对氟康唑天然耐药。结论 各种念珠菌的耐药谱不同,临床一定要鉴定到种。
【关键词】 念珠菌;泌尿系感染
近年来随着广谱抗菌药物及免疫抑制剂在临床的广泛应用及介入治疗的不断增加,使患者罹患真菌感染的比例增加,特别是在中老年患者及应用免疫抑制剂的患者,在念珠菌引起的泌尿系统感染在泌尿系统感染的致病菌中已由2001年的的第十位上升到2010年的第五位。我院自2001年1月至2010年12月期间从门诊和住院患者急、慢性尿路感染患者中分离到的301株念珠菌,年龄从48岁到92岁,其中女265例(占88%),男36例(占12%),用科玛嘉显色培养基和法国梅里埃公司的VITEK32自动微生物鉴定仪鉴定到种,并用ROSCO纸片法对常用抗真菌药物进行了药敏试验,了解我院念珠菌的耐药情况,为临床提供参考
1 材料和方法
11 材料
111 菌株来源 实验用菌株来自2001年1月至2010年12月期间吉林省人民医院泌尿系感染的患者共检出301株念珠菌,其中白念珠菌 210 株(占 698 %),光滑念珠菌 55 株(占 182%),热带念珠菌30株(占 10%),克柔念珠菌3株(占1%),其他念珠菌3株(占 1%)。尿液为晨尿(留取方法为:清洗外阴后,留取中段尿,2 h内送检)[2]。用法国生物梅里埃公司的VITEK32尿卡(UID3)进行培养及计数,用科玛嘉显色培养基鉴定到种,显示翠绿色为白念珠菌,篮色为热带念珠菌,藕合色为光滑念珠菌,粉色为克柔念珠菌,其他颜色用法国梅里埃公司的VITEK32的念珠菌鉴定卡(YBC)细菌鉴定到种。
112 抗菌药物及培养基 抗真菌药物纸片、真菌培养基(Shadomy)均为丹麦ROSCO公司产品。购自广洲迪景公司。
12 方法
121 尿路感染的尿液标本应用法国生物梅里埃公司的VITEK32尿卡(UID3)进行培养及计数,且细菌数>104cfu/ml为阳性。
122 菌种鉴定 用科玛嘉显色培养基鉴定到种,显示翠绿色为白念珠菌,篮色为热带念珠菌,藕合色为光滑念珠菌,粉色为克柔念珠菌,无色及颜色不清者用法国梅里埃公司的VITEK32的念珠菌鉴定卡(YBC)细菌鉴定到种。
123 抗生素敏感试验 采用KB法。用ROSCO公司生产的药敏纸片两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑、5氟胞嘧啶(直径均为9 mm),采用其专用念珠菌药敏培养基(Shadomy)。质控菌株为白念珠菌ATCC64550和白念珠菌ATCC64548及光滑念珠菌2238。先将Shadomy培养基丛4℃冰箱中取出放在室温20 min左右,挑取纯化的念珠菌用生理盐水制成05麦氏浓度菌液,再用生理盐水1∶ 1稀释,用拭子取稀释液涂布于Shadomy琼脂表面,每次旋转120°,注意不要在培养基表面划出划痕,10 min内贴上药敏纸片,放入35℃孵箱中孵育18~24 h,光滑念珠菌延长孵育时间到48 h判读结果。
124 敏感性判定 用厂家提供的说明书判定,两性霉素B没有耐药值,10~14 mm为中介,≥15 mm为敏感;氟康唑≤11 mm为耐药,12~19 mm为中介,≥20 mm为敏感;伊曲康唑没有耐药值,10~14 mm为中介,≥15 mm为敏感,5氟胞嘧啶≤22 mm为耐药,23~29 mm为中介,≥30 mm为敏感。
2 结果
21 念珠菌的种类 检出301株念珠菌中,白念珠菌 210 株(占 698 %),光滑念珠菌 55 株(占 182%),热带念珠菌33株(占 11%),其他念珠菌3株(占 1%)。与全国的比例差不多。白念珠菌仍是尿路感染最常见的真菌[3]。
22 药敏的检测 除克柔念珠菌对氟康唑天然耐药及光滑念珠菌对氟康唑为浓度依赖性(SDD)外,其余念珠菌对常用抗真菌药物均有很好的敏感性。详见表1。
表1 临床常见抗真菌药物对念珠菌的敏感性(%)
白念珠菌
(210株) 热带念珠菌
(33株) 光滑念珠菌
(55株) 克柔念珠菌
(3株) 其他念珠菌
(6株)
两性霉素B 100 100 100 100 667
氟康唑 100 986 923 0 100
伊曲康唑 100 986 100 667 100
5-氟胞
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