浓缩生长因子在骨组织再生和修复上作用研究进展.docVIP

浓缩生长因子在骨组织再生和修复上作用研究进展 　　骨组织再生过程发生异常会导致骨量或骨质结构的改变。而临床中涉及骨组织再生的领域甚多，如：骨折的修复重建、骨肿瘤术后骨缺损的修复，尤其在种植外科领域中齿槽嵴的增高、上颌窦提升术、种植体植入后周围支持骨的修复所涉及到的骨组织再生和修复问题是近年研究的热点之一。因此，深入研究骨组织再生和修复的过程，对于临床应用具有十分重要的意义。新一代的血浆提取物-浓缩生长因子（CGF，Concentrate Growth Factors），在骨组织再生和修复中的作用越来越引起人们的关注。本文就浓缩生长因子在骨组织再生和修复上的作用研究进展综述如下。 　　1 CGF的发展史 　　50年前醋酸纤维素过滤器被用于神经和肌腱再生实验[1]，Murray等[2]在狗的腿骨缺损区应用一种塑料支架，这种方法促使缺损区有大量新骨生成。Hurley等[3]在兔子和老鼠的颅骨缺损区安放机械屏障也有成功的骨再生效果[4-5]，这些研究提供了大量的证据，表明机械屏障能阻止软组织进入骨缺损区，显著提高骨再生和修复。然而，大多数早期研究者的成功归功于他们意识到屏障膜的保存及保护血凝块的作用，但没有意识到屏障膜为成骨细胞创造了独立封闭的空间。1982年，Nyman[6]第一次把屏障膜技术用于牙周病的治疗获得成功，并提出了引导组织再生（Guided Tissue Regeneration，GTR）的概念，其后GTR技术成为牙周病治疗的一项常用手段。1993年，Buser等[7]提出了引导骨再生的概念。现在，GBR技术已被广泛应用在牙槽外科、牙周科和口腔种植领域。在GBR技术中各种骨替代材料与血浆提取物的混合使用在目前的临床应用中被广泛使用。而血浆提取物的研究大致经历了Platelet-rich plasma（PRP），Platelet-rich fibrin（PRF），Concentrate Growth Factors（CGF）三个阶段。1984年，Assoion等[8]发现了人血浆中提取的富血小板血浆（platelet-rich plasma，PRP）中含有多种生长因子，当PRP与氯化钙以及牛凝血酶混合后，各种生长因子即从血小板中的α颗粒中释放出来。它是一种自体来源的通过梯度离心获得的富含血小板衍生生长因子和转化生长因子β等的血浆提取物[9]。1993年，Hood等[10]提出了PRP凝胶（PRPgel ）概念，亦即血小板??胶（platelet gel）。PRP gel是纤维素凝胶的一种改良应用，由自体全血离心产生PRP，然后与凝血酶和氯化钙混合而成的一种具有粘性的胶状凝块。PRP凝胶与纤维素凝胶最本质的区别是PRP凝胶含有高度浓缩的血小板及其固有的浓缩的纤维素原。血小板被凝血酶激活，释放出一系列的因子而发挥其作用。PRP凝胶最初被作为一种生物凝胶和屏障膜而应用于临床[11]。1997年，Whitman率先将自体的PRP应用于口腔临床研究中并取得了良好效果，随后PRP技术成为口腔种植骨缺损修复和骨整合研究中的热点[12]。目前，对于PRP的研究和应用还存在较大争议。主要集中在PRP的确切作用机制、PRP能发挥作用的剂量、PRP的安全性问题、PRP能否引起感染等[13]。 　　作为第二代浓缩血小板，富血小板纤维蛋白（PRF）是由Choukroun首次引入的[14]。PRF是富纤维蛋白凝胶，由患者静脉中抽取的新鲜血液制作而成，属于新一代的血小板浓缩物，它制备简单无需任何生物添加剂的处理。它缓慢的聚合似乎形成了类似自然的纤维网络。在PRF通过离心分离的制备过程中，血小板被激活的同时大量脱颗粒细胞中蕴含的重要的生长因子释放出来，在对PRF进行加工的同时白细胞也隐藏在细胞因子中，对炎症和止血起到作用，并且加速组织愈合和血管生成，组织学评估表明PRF能够缩短骨形成时间[15]。PRF方案无需凝血酶之类的化学添加剂即可制成凝胶状物体。因此，PRF无交叉污染之忧。浓缩生长因子（CGF）是Sacco首次开发出来的[16]。与PRF一样，CGF由静脉血分离制作而成。不过，该技术的离心速度有所不同。CGF是一种具有完全独特属性的愈合型生物材料。外科医生可以将CGF作为隔膜来加速软组织愈合或与骨移植物混合，以加快新骨重建。CGF无需任何化学或过敏性添加剂（如：凝血酶或抗凝剂），因此，不会引起病毒性传染病。 　　2 CGF的基本原理和分离技术 　　2.1基本原理：CGF血纤维蛋白分子结构为三键式联结，呈立体网状结构，可有效地滞纳血小板及各种循环分子（如细胞因子）。当CGF应用于损伤的组织时，通过引导损伤组织的再血管化，免疫调节以及捕获循环血中的干细胞，最终促进组织愈合再生和修复。 　　2.2分离技术：将患者的静脉血采集10ml于试管中，并立即放