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　 实验十二　APTT、PT、TT测定 目的：掌握实验原理 操作方法 临床意义 质量控制 临床血液学教研室 王 侠 一、实验原理 APTT Ca2+ 脑磷脂 白陶土 Ca2+ 脑磷脂 部分凝血活酶 PT 组织因子 Ca2+ 磷脂 凝血酶 TT 二、材料 1、半自动血凝仪、水浴箱、塑料试管、 秒表 2、 APTT： 4%白陶土-脑磷脂悬液 0.025mol/L氯化钙溶液 PT ：0.025mol/L氯化钙凝血活酶溶液 TT：凝血酶 3、正常对照血浆、受检血浆 三、操作 （一）1．APTT手工法(试管法） 　血浆100μL ＋APTT试剂100μL 　+　CaCl2 100μL 　　（混匀计时） 　结果观察：缓慢倾斜试管，观察液体流动状态，流动 停止终止计时。 　　　　　２.平皿法(试剂和血浆用量同１) 　　结果观察：不断来回挑动混合物，观察血浆纤维的生成，观 察到开始有纤维丝产生时终止计时。 参考值 23～36s 　　　　　　37℃水浴 　　　　5min 37℃温浴 PT :磁珠+血浆50μL + PT试剂100μL（37℃） 参考值 10.２～1５s TT:磁珠+血浆100μL + TT试剂100μL（室温） 参考值 ８～1５s 37℃预温 3min （二）PT、TT(半自动血凝仪法） 37℃预温 2min （三）报告方式: APTT: S(参考范围: ) 参比血浆: S(手工法) PT: S(参考范围: ) 参比血浆: S TT: S(参考范围: ) 参比血浆 : S 四、临床意义 APTT PT TT 延长 因子VIII、IX、XI活性减低 因子II、V、VII、X、Fg活性减低 Fg异常、循环中抗凝物质增多 缩短 高凝状态 高凝状态 少见 监测指标 口服肝素抗凝药物监测 口服双香豆素类抗凝药物监测 链激酶、尿激酶作溶栓治疗时的监测 五、注意事项 1、标本的采集和处理，标本放置不应超过2h 2、收到后注意观察标本，分离血浆注意离心 速度和时间 3、操作要准确 4、使用试剂前应仔细阅读说明书 37℃试剂位 室温试剂孔 37℃加样器孔 37℃带搅拌试剂孔 室温加样器孔 联动加样枪 （一） APTT:手工法(试管法） 血浆100μL ＋APTT试剂100μL + CaCl2 100μL （混匀计时） 结果观察：不断来回挑动混合物，观察血浆纤维的生成，观察到开始有纤维丝产生时终止计时． （二) PT:半自动血凝仪法 磁珠+血浆50μL ＋ PT试剂各100μL （37℃） （三）TT:半自动血凝仪 磁珠 +血浆100μL + TT试剂100μL(室温) 37℃水浴 5min 37℃温浴 37℃预温 3min 37℃预温 2min 思考题： 本次实验课的关键环节是什么？