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第五章 有效成分提取分离个例 一、生物碱的提取分离 长春花不仅姿态忧美，花期特长，适合布置花坛、花境，也可作盆栽观赏。还是一种防治癌症的良药。据现代科学研究，长春花中含55种生物碱。其中长春碱和长春新碱对治疗绒癌等恶性肿瘤、淋巴肉瘤及儿童急性白血病等都有一定疗效，是目前国际上应用最多的抗癌植物药源。 药理作用 : 1.抗肿瘤作用: 从长春花植物中分离出的生物碱，多具抗肿瘤作用，其中以长春碱、长春新碱最有价值，己应用于临床。 2.降压作用: 总碱静脉注射，对麻醉猫、兔均有降压作用，血压下降速度快。从长春花中分离得针状或小棒状无色生物碱结晶有显著降压作用，并且能使血压降至原水平之下。总碱还有扩张冠状血管的作用(属于解痉性神经节阻断剂)。 3.降血糖作用 生物碱的提取分离流程图 二、皂苷类成分的提取分离 人参主要成分为人参皂苷，含量约为4%，按照极性由大到小命名为Ro、Ra、Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re、Rf、Rg1、Rg2、Rg3、Rh等。 人参皂苷大多数是白色无定形粉末或无色结晶，味微苦，具有吸湿性，一般对不稳定，弱酸下即可水解，但在水解后得不到真正的原形皂苷元。 人参皂苷易溶于水、甲醇、乙醇，可溶于正丁醇、乙酸、乙酸乙酯，不溶于乙醚、苯。 人参粗皂苷提取工艺流程 正丁醇萃取、硅胶柱纯化人参皂苷工艺流程 三、多糖类成分的提取分离 芦荟的有效成分是芦荟多糖，主要是甘露糖，其中一部分以葡萄甘露聚糖的形式存在，一部分以链式半乳糖存在。 芦荟多糖的提取分离流程 四、黄酮类成分的提取分离 银杏叶中含有黄酮类和二萜内酯类。黄酮类包括：槲皮素、山奈酚、银杏素（白果双黄酮）、异银杏素（异银杏双黄酮）等，二萜内酯包括银杏内酯A、B、C等。 黄酮类化合物提取分离流程 长春花全草干粉 加水溶解，加6倍量的苯冷渗 苯渗漉液 6%酒石酸进行液-液逆流萃取 酸水液 氨水调pH6～7，氯仿萃取 氯仿液 氨水调pH6～7，氯仿萃取 静止、脱水，减压蒸干 总生物碱 加甲醇（1：1.5）放置过夜，滤去结晶 结晶（异长春碱） 甲醇滤液 减压蒸干、抽滤 纯化总生物碱 ①加无水乙醇（1：0.5） ②加5%的硫酸-无水乙醇溶液至pH3.8～4.1，放置 生物碱硫酸盐结晶 加水溶解，氨碱化，氯仿提取 氯仿液 无水硫酸钠脱水，蒸干 游离弱碱 氧化铝柱色谱，苯-氯仿（1：2）洗脱 前段（长春碱） 中段（长春次碱） 后段（长春新碱） 长春花原料粉 75%乙醇提取三次 乙醇提取液 减压浓缩、回收乙醇 浸膏 溶于90%乙醇中，冷却至0℃ 长春花生物碱粗粉 粗粉-水-乙醇（100：200：40000） 结晶 长春碱粗品 上300～500目硅胶， 氯仿-甲醇（100：2）洗脱 硫酸长春碱粗品 硫酸长春碱晶体 人参粉末 80%甲醇75℃回流3h 人参粗提物 55℃真空浓缩，加水溶解 水溶液 乙醚萃取两次 乙醚层 水层 丁醇萃取四次，溶于水成饱和溶液 丁醇层 水层 丁醇层 水洗两次 水层 粗皂苷 糖 溶于甲醇，0.45μm膜过滤 55℃真空浓缩 TLC、HPLC分析皂苷 人参根粗粉 甲醇提取，减压回收甲醇，残渣用水混悬 水溶液 乙醚萃取 水溶液 正丁醇萃取 水溶液（糖类） 正丁醇溶液 减压回收溶剂 总皂苷（粗品） 第一部分 乙醚溶液（脂类成分） 人参皂苷Ro 硅胶柱色谱CHCl3-CH3OH-H2O下层为洗脱剂 第二部分 第三部分 第四部分 第五部分 人参皂苷Rb1 硅胶柱色谱 正丁醇-乙酸乙酯-水（4：1：2） 同第二部分 大孔吸附树脂、水-乙醇梯度洗脱 人参皂苷 Rb2、Rc 去离子水浸30min，切去表皮、榨汁、冷藏过夜 芦荟鲜叶 人参皂苷 Rd、Re 硅胶柱色谱CHCl3-CH3OH-乙酸乙酯-H2O（2：2：4：1） 人参皂苷Rg1、Rh1、Rg2 同第四部分 粗提物 离心过滤 芦荟汁 残渣 上清液 减压浓缩、离心过滤 乙醇沉淀、离心 上清液 多糖沉淀 DEAE-C32色谱，蒸馏水、0.5和1mol/L氯化钠洗脱 芦荟粗多糖 少量蒸馏水溶解，离心过滤 残渣 上清液 粗多糖Ⅰ 粗多糖Ⅱ 粗多糖Ⅲ 乙醇、丙酮、乙醚淋洗、真空干燥 银杏叶 95%乙醇提取三次，过滤提取液 滤液 回收乙醇，静止，过滤 提取物 20%乙醇溶解，过滤 滤液 反复经硅胶柱色谱 氯仿-甲醇梯度洗脱 （95：1～1：1） 总黄酮 回收溶剂至干 各种黄酮 乙醇萃取浓缩