2012高考生物一轮复习精选课件：选修三 3.1.基因工程(新人教版)PPT.ppt

(1)DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸加到已有的脱氧核苷酸片段的3′末端的羟基上，形成磷酸二酯键；而DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，不是在单个核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键。 (2)DNA聚合酶是以一条DNA链为模板，将单个脱氧核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链；而DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来，因此，DNA连接酶不需要模板。 二、限制酶和DNA连接酶的区别与联系 限制酶 DNA连接酶 作用 切割目的基因或载体 将两个DNA片段连接 作用过程 基因工程第一、二步都用到了，且用的是同一种，目的是产生相同的黏性末端 基因工程第二步将目的基因与载体连接成重组DNA分子或形成基因表达载体 作用对象及效果 都作用于磷酸二酯键，与氢键无关，但作用效果相反 酶的特性 有催化作用，可重复利用，受温度、pH等影响 三、载体的特点及作用 (1)一般来说，天然载体往往不能同时具备载体必须具备的条件，所以在基因工程中需要根据不同的需要，对载体进行人工改建。现在所使用的质粒载体几乎都是经过改建的。 (2)作为载体必须具有多个限制酶切点，而且每种酶的切点最好只有一个。因为某种限制性内切酶只能识别单一切点，若载体上有一个以上的酶切点，则切割重组后可能丢失某些片段，若丢失的片段含复制起点区，则进入受体细胞后便不能自主复制。一个载体若只有某种限制酶的一个