《现代分子生物学》第三章 染色体和基因PPT.ppt

第三章 染色体和基因;一　遗传的染色体学说;;; 摩尔根：基因的染色体理论（连锁和交换）;二　１. 原核生物的染色体;大肠杆菌没有明显的核结构，但其DNA有一个相对集中的区域，在这一个小区域中形成类核（nucleoid）。 类核的DNA成分占80％，其余为RNA和蛋白质。用RNA酶或蛋白酶处理类核，可使之由致密变得松散。表明RNA和某些蛋白质分子起到稳定类核的作用。;;;;大肠杆菌染色体是由4.2?106碱基对组成的双链环状DNA分子，在DNA结合蛋白质的作用下压缩成一个手脚架形（scaffold）结构。 大肠杆菌染色体形成100个左右的小区（domain），小区内都是负超螺旋。用微量的DNAaseⅠ处理时，只能使一小部分的DNA由超螺旋状态变成松弛状态。;;λ噬菌体染色体 λ噬菌体的双链DNA有两种形式，一种是带有切刻的环状分子，切刻部分通过粘性末端的互补碱基之间的氢键而连接。另一种形式是两个粘性末端相互分离，形成线性分子。 λ噬菌体共有48,502碱基对，包装在由蛋白质组成的头部外壳之中。;λ噬菌体在大肠杆菌体内可以呈环形分子游离存在于细胞质中，也可以通过整合酶的作用而整合到寄主染色体上成为原噬菌体状态，并与寄主染色体一起复制。这种现象称为溶原化。;;　２. 真核生物的染色质与染色体;;;;;;染色质的化学组成：;? 组蛋白;组蛋白的特性;Olins夫妇（1974）和Pierre Chambon等（1975）在电镜下观察到染色质的“绳珠”状结构，小球的直径为100埃。 X衍射图表明组蛋白的多聚体是紧密相联，并无可容纳像DNA分子那样大小的孔洞， ;;;1974年Kornberg和Thomas 先用小球菌核酸酶稍稍消化一下染色质，切断一部分200核苷酸对单位之间的DNA，使其中含有单体、二聚体、三聚体和四聚体等。然后经离心将它们分开。每一组再通过凝胶电泳证明其分子大小及纯度。然后分别用电镜来观察各组的材料；结果单体均为一个100埃的小体，二聚体则是两个相联的小体，同样三聚体和四聚体分别由三个小体和四个小体组成， 1984年Klug和Butler进行了修正核小体模型。;核小体的梯度离心和电泳;核小体的结构;;MW Chromosomal Proteins;;The Nucleosome 146 bp DNA 2X H3, H4, H2A, H2B;;;核小体的结构;;;Helix III - Major groove binding;更高层次的DNA折叠包装组织情况尚不清楚。但是有证据表明，染色体DNA的某一些部分和“核骨架”(nuclear scaffold)相连。这些与核骨架相联系的部分，把染色体DNA隔成许多含20 000～10 0000bp长的DNA环，每个“环” (loops)有相对的独立性。当一个环被打断或被核酸酶所松弛时，其他环仍可保持超螺旋状态。每个环中含有一些相关的基因。 ;染色质和染色体的多级结构;;;;30nm螺旋管;染色体包装的支架环（scafold loop）模型 Laemmli等发现每个染色单体均由染色质纤维所构成的环所组成。每个环大约含有75 kb的DNA，环附着在中央酸性非组蛋白组成的支架上。支架环进一步包装形成染色单体。 特殊类型的染色体—灯刷染色体和多线染色体中也可以看到上述的支架环结构。大肠杆菌的环结构域与支架环相似。;;;;;;染色体中的关键结构： 染色单体每一个染色体由两条染色单体组成，同一个染色体中的两个染色单体是由一条DNA分子链复制后形成的两条子代DNA链所构成，每一条染色单体中有一条DNA分子； 着丝粒（主缢痕）：由特殊的重复DNA序列和蛋白质结构构成，是细胞有丝分裂时的重要结构；着丝粒把染色体分为长臂和短臂；着丝粒区域的功能是使复制的染色体在有丝分裂和减数分裂中可平衡分配到子细胞中。 ;;;;端粒：由特殊的重复DNA序列和相应的蛋白质构成，起着稳定染色质和染色体结构的作用。 常染色质和异染色质： 用碱性染料处理中期染色体，染色体上部分区域着色较深，称为异染色质，高度凝缩且没有转录能力。;;端粒共同特点：;端粒的功能;《科学》重大发现：端粒可作为RNA合成模板;法国原子能委员会的分子生物学家Laure Sabatier说，这是一项重大的突破，从来没有人会想过，端粒能够作为合成RNA的DNA模板。Lingner表示，目前尚不清楚该发现是否能够为癌症治疗提供新途径，端粒附近RNA的作用也还不清楚。他们的实验还显示，当端粒附近RNA水平升高，端粒的丢失速度会加快。但这二者之间是否直接相关还有待研究。 ;;;端粒 (telomere)端粒是真核细胞内染色体末端的蛋白质-DNA结构,其功能是完成染色体末端的复制,防止染色体免遭融合,重组和降解.从单细胞