双指标化学发光免疫分析法早期诊断脑部疾病79页.pdfVIP

摘要 摘要 随着人类基因组测序的完成，恶性疾病研究的重点从基因组学转移到蛋白质 组学研究中。蛋白质多组分同时检测已成为当前生物分析检测的热点，在临床诊 断、环境监测等领域有着广泛的应用。与传统平行单一组分分析相比，多组分同 时测定具有样品通量高，分析效率高，样本需求少，检测成本低等优点。生物标 志物一般定义为疾病发生、发展过程中表达量发生变化的生物分子，可反映疾病 发展的程度、治疗效果和预测重复发病率。理想的标志物检测技术可以在复杂生 物样品中同时实现多个组分的高灵敏度检测。 化学发光免疫分析法作为一种广泛发展的分析技术，兼有免疫反应的特异性 和化学发光分析的高灵敏度。本文利用辣根过氧化物酶(HI冲)和碱性磷酸酯酶 (ALP)催化发光方法，发展了两种不同模式的双指标同时检测的化学发光免疫 分析新技术，应用于脑部疾病(脑胶质瘤和脑卒中)血清标志物分析。论文分为 以下三个部分： (1)综述目前多组分检测技术的进展，包括基于标记物识别模式的多组分检测 和基于空间位置识别模式的多组分检测，后者包括芯片技术和编码微球技术等。 (2)以聚苯乙烯微孔板为载体，I-IRP和ALP双标记，构建脑胶质瘤特异性抗原 分别为0．2～10 u／mL(RZ0．99)，最低检测限分别为 ng／mL(R20．99)和0．2～10 0．2 U／mL。制备高、中、低浓度的三个模拟血清样本，回收率良好， ng／mL和0．2 两种蛋白检测无交叉干扰，有望为脑胶质瘤的临床早期诊断提供坚实的支持。 (3)以磁性微球为载体，构建了一种磁分离双组分化学发光免疫分析技术，测 定脑卒中特异性抗原sloop和NSE，均相免疫反应，磁性微球快速分离，双组 ng／mL 分之问不存在交叉反应，对sloop和NSE的检测线性范围分别为0．02-1 (R20．99)和1～20 ng／mL和0．2 ng／mL(R20．99)，最低检测限分别为0．005 ng／mL。实验考察了血清对抗原检测灵敏度的影响，结果表明：此法回收率和重 现性良好，方法可靠，适合于脑卒中病人的早期诊断。 关键词：脑胶质瘤：脑卒中；双指标；多组分检测；化学发光免疫分析 中图分类号：R94 Abstract Abstract Withhuman been of focus genomesequencinghaving done，the malignant diseaseresearchwastransferred from toproteomics detectionof numerous has considerableinterestinvariousfield proteinsgained clinical with includingdiagnosis，environmental protection，etc．Comparedparallel offerssomeremarkable single—analyteimmunoassays，amulti-analyteimmunoassay as