免疫学技术-2.新技术应用2012.12PPT.ppt

Nature Immunology 3, 887 - 889 (2002) Frontiers in peptide¨CMHC class II multimer technology In site tetramer 原位四聚体技术 A：SIV A *01/Gag tetramer 染色 B： 抗CD8抗体染色 C： A＋ B Ig gene transcripts showed in different types of cancer cells By Single Cell RT-PCR Detection of Ig gene rearrangement of V-D-J(heavy chain) by RT-PCR V D J C RT-PCR V D J C γ/μ chain Detection of Ig gene rearrangement of V-J(kappa chain) by RT-PCR V J C RT-PCR V J C Kappa chain ◆ 激光捕获显微分离(Laser Capture Microdissection －LCM ????) 整体成像技术 Zhao L，Ding YQ et al. Gut 59:1226-1235, 2010 LIM and SH3 protein 1(LASP-1) 促进肿瘤生长与转移 Pan QJ et al. Internal Immunopharmacology. 10 (2010) 967–977 体内成像技术检测LPS/D-GalN诱发致死性肝损伤的NF-kB activity 活性 Stabilized imaging of immune surveillance in the mouse lung Mark R Looney et al Nature methods 8 : 91-98, 2011 实时细胞内成像技术 芯片技术 ◆ 基因芯片 ◆ 蛋白芯片 ◆ 肽芯片 ◆ 糖芯片 ◆ 抗体芯片 ◆ 液体芯片 …… Lymphochip Clustering Analysis Defined Gene Expression Signatures Gene Expression Physiology of Immune Response Antibody-based Protein Array 1. Incubate soluble sample on plate or  membrane-immobilized antibody array 2. Add a mix of labeled soluble antibody  against the same set of antigens 3. Incubate with developing system and quantitate signal Full set of data 1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6 Nature Biotechnology 20:270, 2002 Nature Biotechnology, 20:275, 2002 人和小鼠抗各种微生物抗体的微阵列检测及抗体特性 单抗3H9.2与部分胎儿组织的结合 组织芯片： 各种正常与肿瘤组织 Nature biotechnology 20：359，2002 Multiplexed Protein Profiling on Microarrays by Rolling-circle amplificaion (RCA) 将7种细胞因子混合，系列稀释后点样于单抗subarrarys , 此处显示4种细胞因子，分别为： sIL-6R、MDC、 1－309、Biotin-mIgG(阳性对照） 目标： 特异、敏感、集成、简便、实用（如样品处理）、经济 趋势: ◆ 高度依赖分子生物学技术与蛋白质技术 ◆ 越来越多地利用生物信息学 ◆ 不断推出的先进设备提高了研究的速度与成本 ◆ 免疫学理论与实践的快速进展与技术进步相互促进 ◆ 技术的进步极大地推动了科研成果的产业化 ★ 关键 ◆ 正确的选题与实验设计 ◆ 对技术的了解与把握