园艺植物生物技术—第七章PPT.ppt

pBR322质粒载体的优点 ①自身分子量小 4363bp ②同时具有两种抗菌素抗性基因可供作转化子的选择记号 ③具有较高的拷贝数 pUC质粒载体 pUC质粒是在pBR322载体质粒的基础上，组入了一个在其5‘端带有一段多克隆位点的lacZ’基因，而发展成为具有双功能检测特性的新型质粒载体系列。 pUC取名是根据它们的加州大学(University of California)的科学家J.Messing和J.Vieria于1987年首先构建的 (1)pUC质粒载体的结构 pUC系列质粒载体包括以下四个组成部分： ①来自pBR322质粒的复制起点ori）； ②氨苄青霉素抗性基因Ampr，但它的DNA中核苷酸序列已发生了变化，不再含有原来的核酸内切限制酶的识别位点； ③大肠杆菌β-半乳糖苷酶基因（lacZ）的启动子及编码α-肽链的DNA序列，此结构称为lacZ`基因； ④位于lacZ’基因中的靠近5`端的一段多克隆位点（MCS）区段，但它并不破坏该基因的功能。 pUC18 / 19：正选择标记 lacZ’ 的显色原理 pUC18/19 Plac lacZ’ MCS b-半乳糖苷酶的a-肽段 a b 5-溴-4-氯-3-吲哚基-b-D-半乳糖苷 X-gal 5-溴-4-氯靛蓝（蓝色） (2)pUC质粒载体的优点 ①具有更小的分子量(2686bp)和更高