实验一 质粒制备1PPT.ppt

分子生物学实验课程;生物技术概念与特征;基因工程的概念;基因工程(gene engineering)常和以下名称混用: 遗传工程(genetic engineering); 基因克隆(gene cloning); 分子克隆(molecular cloning); 基因操作(gene manipulation); 重组DNA技术(recombination DNA technique) ;包括基因的分离、重组、转移、基因在受体细胞内的保持、转录、翻译表达等全过程 基因工程四要素：目的基因、工具酶、载体、受体细胞 ;基因工程的应用;基因工程技术路线;本课程通过GSTZ基因克隆实验，使大家对分子生物学有一个感性的认识。 分离GSTZ基因（质粒DNA提取） PCR扩增 限制性内切酶切割载体和目的基因 载体和目的基因的连接 连接子转移入受体细胞 重组子筛选 目的基因表达及酶活性分析;实验一：细菌质粒DNA的碱法制备通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒。  ;DNA片段的获得;　　　质　粒（plasmid）;常用的质粒载体;pMID-GSTZ 3.5Kb 共价、闭合、环状的DNA分子 要去除的物质： 蛋白 基因组DNA RNA 脂类及小分子杂质 ;一、提纯的思路;DNA 是具有一定结构的物质，一些特殊的环境会导致DNA的变性，如加热、极端pH值、有机溶剂、尿素、酰胺试剂等，而适宜的环境又