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实验二 微生物的分离、纯化与接种培养 一、实验目的 二、实验原理 三、实验器材（详略） 四、实验内容步骤 五、思考题 掌握 倒平板的方法 几种常用分离纯化微生物的基本操作技术 实验目的 平板菌落计数的基本原理和方法 （一）微生物的分离与纯化的概念 实验原理 从混杂的微生物群体中获得只含 有某一种或某一株微生物的过程 实验原理 （二）分离纯化微生物的常用方法 1.简易单细胞挑取法 单细胞挑取法可以直接得到纯培养。它需要特制的显微操纵器来分离单细胞，或直接在普通显微镜下利用低倍镜分离单孢子的方法。 2.固体平板分离法 选择适合于目标微生物生长的培养基 设计获取单菌落的有效方法 纯培养的确认 实验原理 单菌落并不一定保证是纯培养。还应结合菌落特 征、显微镜检测个体形态特征；甚至要经过多次 的分离与纯化过程和多种特征鉴定才能获得 涂布平板法 稀释倒平板法 平板划线法 单菌落 采样 倒平板（无菌操作） 制备土壤稀释液（无菌操作） 平板分离单菌落（无菌操作） 培养 确认单菌落 实验内容步骤 取表层以下5-10cm处的土样，放入灭菌的袋中备用，或放在4℃冰箱中暂存。 培养基加热溶化，待冷至55-60℃ 倒入培养基于无菌培养皿中 200ml 培养基倒8个平板（15-20ml/皿） 无 菌 操 作 制备土壤悬液 5g土+45ml无菌水 梯度稀释 0.5ml样品+4.5ml无菌水 无