高中生物人教版选修1教学案：专题二 课题1 微生物的实验室培养(含答案).docVIP

课题1微生物的实验室培养 1．培养基中需含有碳源、氮源、水和无机盐等营养物质。 2．消毒的目的是杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，灭菌则是杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。 3．实验室常用煮沸消毒法、巴氏消毒法和使用紫外线或化学药剂进行消毒，常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌等。 4．固体培养基的配制过程为：计算―→称量―→溶化―→灭菌―→倒平板。 5．微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。 6．长期保存菌种可以采用甘油管藏法。 一、培养基 1.概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。 2.种类：(按物理性质分) 液体培养基固体培养基 3.营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 二、无菌技术 1.获取纯净培养物的方法 获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，具体操作如下： (1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。 (2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。 (3)为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 (4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。 2．消毒和灭菌 (1)概念：[填表] 比较项目 理化因素的作用强度 消灭微生物的数量 芽孢和孢子能否被消灭 消毒 较为温和 物体表面或内部的部分微生物 不能 灭菌 强烈 物体内外所有的微生物 能 (2)常用方法：[连线] 三、大肠杆菌的纯化培养 1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 计算―→称量―→溶化―→灭菌―→倒平板。 2.纯化大肠杆菌 (1)纯化原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。 (2)接种方法： 平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 (3)培养：将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37_℃恒温箱中，培养，12 h和24 h后，分别观察、记录。 四、菌种的保存[连线] 1．不同培养基的具体配方不同，但一般都含(　　) A．碳源、磷酸盐和维生素 B．氮源和维生素 C．水、碳源、氮源和无机盐 D．碳元素、氧元素、氢元素、氮元素 解析：选C　培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机 盐，此外还应考虑pH、特殊营养物质及O2等条件。 2．获得纯净培养物的关键是(　　) A．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌 B．接种纯种细菌 C.适宜环境条件下培养 D．防止外来杂菌的入侵 解析：选D　获得纯净培养物的关键是防止外来微生物 的污染。 3．下列关于消毒和灭菌方法的选择，对应错误的是(　　) A．培养基——高压蒸汽灭菌 B．牛奶——煮沸消毒 C．接种环——灼烧灭菌 D．实验者双手——化学消毒 解析：选B　对牛奶应采用巴氏消毒法进行消毒。 4．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是(　　) A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌 C．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 D．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板 解析：选C　制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，应先根据需 要计算各成分用量，然后称量、溶化、灭菌、倒平板。 5．下列有关稀释涂布平板法的叙述，错误的是(　　) A．首先将菌悬液进行一系列的梯度稀释 B．然后将不同稀释度的菌悬液分别涂布到琼脂固体培养基的表面 C．在适宜条件下培养 D．结果都可在培养基表面形成单个的菌落 解析：选D　稀释涂布平板法是将菌悬液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌悬液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，在适宜条件下培养。只有在稀释度足够高的菌悬液里，聚集在一起的微生物才能被分散成 单个细胞，从而在培养基表面形成单个的菌落。 1．培养基配制的原则 (1)目的要明确：不同的微生物需求不同，根据培养目的进行配制。 (2)营养要协调：营养物质的浓度和比例要适宜。营养物质浓度过低不能满足微生物营养需要，过高对微生物的生长有抑制作用。 (3)pH要适宜：各种微生物适宜生长的pH范围不同，如细菌的适宜pH约为6.5～7.5、放线菌的适宜pH约为7.5～8.5、真菌的适宜pH约为5.0～6.0。为维持pH的相对恒定，可在培养基中加入缓冲剂，常用的缓冲剂是磷酸氢二钾—磷酸二氢钾。 2．培养基的成分 营养物质 定义 作用 主要来源 碳源 凡能提供碳元素的物质 构成生物体细胞的物质和一些代谢产物，有些也是异养生物的能源物质 无机碳源：CO2、NaHCO3等；有机