第4章 生物信息的传递(下)-从RNA到蛋白质PPT.ppt

一、多肽链折叠为天然功能构象蛋白质 新生肽链N端在核蛋白体上一出现，肽链的折叠即开始。 一般认为，多肽链自身氨基酸顺序储存着蛋白质折叠的信息，即一级结构是空间构象的基础。 促进蛋白折叠功能的大分子: 1. 分子伴侣 (molecular chaperon) 2. 蛋白二硫键异构酶 (protein disulfide isomerase, PDI) 3. 肽-脯氨酰顺反异构酶 (peptide prolyl cis-trans isomerase, PPI) 真核生物： Met-tRNAiMet(initiator-tRNA) 原核生物： fMet-tRNAifMet (N-formyl methionine) （二）起始肽链合成的氨基酰-tRNA 翻译的起始(initiation) 翻译的延长(elongation) 翻译的终止(termination ) 整个翻译过程可分为 ： 一、肽链合成起始 指mRNA和起始氨基酰-tRNA分别与核蛋白体结合而形成翻译起始复合物 (translational initiation complex)。 原核、真核生物各种起始因子的生物功能 （一）原核生物翻译起始复合物形成 1. 核蛋白体大小亚基分离； 2. mRNA在小亚基定位结合； 3. 起始氨基酰-tRNA的结合； 4. 核蛋白体大亚基结合。 IF-3 IF-1 1. 核蛋白体大小亚基分离 A U G 5 3 IF-3 IF-1 2. mRNA在小亚基定位结合 S-D序列：mRNA 起始密码前的一段富含嘌呤核苷酸的序列,可与核糖体小亚基16S-rRNA上富含嘧啶序列相结合。 IF-3 IF-1 IF-2 GTP 3. 起始氨基酰tRNA( fMet-tRNAimet )结合到小亚基 A U G 5 3 IF-3 IF-1 IF-2 GTP GDP Pi 4. 核蛋白体大亚基结合，起始复合物形成 A U G 5 3 IF-3 IF-1 A U G 5 3 IF-2 GTP IF-2 -GTP GDP Pi （二）真核生物翻译起始复合物形成 核蛋白体大小亚基分离； 起始氨基酰-tRNA结合； mRNA在核蛋白体小亚基准确就位； 核蛋白体大亚基结合。 met 40S 60S Met Met 40S 60S mRNA eIF-2B、eIF-3、 eIF-6 ① elF-3 ② GDP+Pi 各种elF释放 elF-5 ④ ATP ADP+Pi elF4E, elF4G, elF4A, elF4B,PAB ③ Met Met-tRNAiMet-elF-2 -GTP 真核生物翻译起始复合物形成过程 二、肽链合成延长 指根据mRNA密码序列的指导，次序添加氨基酸从N端向C端延伸肽链，直到合成终止的过程。又称为核蛋白体循环(ribosomal cycle) 包括以下三步： 进位(entrance) 成肽(peptide bond formation) 转位(translocation) 延伸过程所需蛋白因子称为延长因子(elongation factor, EF) 原核生物：EF-T (EF-Tu, EF-Ts) EF-G 真核生物：EF-1 、EF-2 原核延长因子 生物功能 对应真核延长因子 EF-Tu 促进氨基酰-tRNA进入A位，结合分解GTP EF-1-α EF-Ts 调节亚基 EF-1-βγ EF-G 有转位酶活性，促进mRNA-肽酰-tRNA由A位前移到P位，促进卸载tRNA释放 EF-2 肽链合成的延长因子 又称注册(registration) （一）进位 指根据mRNA下一组遗传密码指导，使相应氨基酰-tRNA进入核蛋白体A位。 延长因子EF-T催化进位（原核生物） Tu Ts GTP GDP A U G 5 3 Tu Ts GTP （二）成肽 是由转肽酶(transpeptidase)催化的肽键形成过程。 （三）转位 延长因子EF-G有转位酶( translocase )活性，可结合并水解1分子GTP，促进核蛋白体向mRNA的3侧移动 。 fMet A U G 5 3 fMet Tu GTP 进位 转位 成肽 三、肽链合成的终止 当mRNA上终止密码出现后，多肽链合成停止，肽链从肽酰-tRNA中释出，mRNA、核蛋白体等分离，这些过程称为肽链合成终止。 终止相关的蛋白因子称为释放因子(release factor, RF) 一是识别终止密码，如RF-1特异识别UAA、UAG；而RF-2可识别UAA、UGA。 二是诱导转肽酶变为酯酶活性，使肽链从核蛋白体上释放。 释放因子的功能: 原核生物释放因子：RF-1，RF-2，RF-3 真核生物释放因子：eRF 原核肽链合