第6章 分子生物学翻译PPT.ppt

核糖体的作用位点 ⑴A位点（或称 acceptor site）可以进入 氨基酰-tRNA(aminoacyl-tRNA)。 ⑵ P位点(或称供位，donor site) 是被肽基 酰-tRNA(peptidyl-tRNA)所占据。 (3)E位点(Exit site) 脱酰tRNA(deacylated- tRNA)短暂地占据。 图 6.8 (a) 70S起始复合体上的三个tRNA结合位点；(b) 起始tRNA最初结合在P位。 U A C ? ? ? 5’ 3’ mRNA P site A site E site f Met A U G C A G G C U A C G G A G A C U A G G 5’ 3’ mRNA A U G C A G G C U A C G G A G A C U A G G (a) (b) 6.2.2 延伸 在多肽链上每增加一个氨基酸都需要经过进位、转位和移位三个步骤： 进位：为密码子所特定的氨基酸tRNA结合到核蛋白体的A位，称为进位。 转位：涉及肽键的形成。 移位：转位作用发生后，氨基酸都位于A位，P位上无负荷氨基酸的tRNA就此脱落，核蛋白体沿着mRNA向3’端方向移动一组密码子，使得原来结合二肽酰tRNA的A位转变成了P位，而A位空出，可以接受下一个新的氨基酰tRNA进入。 以后，肽链上每增加一个氨基酸残基，即重复上述进位、转位、移位的步骤，直至所需的长度，实验证明mRNA上的信息阅读是从5’端向3’端进行，而肽链的延伸是从氨基端到羧基端。所以多肽链合成的方向是N端到C端。 图 6.9 翻译延伸的循环机理 AUG 1 2 3 aa1 AUG 1 2 3 aa1 Peptidyl transfer (Round 1) Met Met f f tRNA1 entering AUG 1 2 3 aa1 f Met Translocation AUG 1 2 3 aa1 Met f aa2 tRNA2 entering Initiator tRNA leaving AUG 1 2 3 Met f aa2 aa1 Translocation 4 AUG 1 2 3 aa1 4 5 Met f aa2 tRNA1 leaving aa3 tRNA3 entering AUG 1 2 3 aa1 Met f aa2 Peptidyl transfer (Round 2) tRNA2 O 图 6.10 肽键形成，由肽基转移酶催化。 AUG 1 2 3 aa1 Met f aa2 H N C C R1 O H N H C C R2 O ? ? tRNA1 O AUG 1 2 3 Met f aa2 aa1 tRNA2 O N C C R1 O N H C C R2 O tRNA1 OH H H H H H P site A site P site A site Peptidyl transferase 肽基转移酶：在核糖体内催化形成肽键的酶称为肽基转移酶。 过去认为，大亚基的蛋白质具有酶的活性，促使肽键形成，故称为转肽酶。20世纪90年代初，H.F.Noller等证明大肠杆菌的23SrRNA能够催化肽键的形成，才证明rRNA是一种核酶，从而根本改变了传统的观点。核糖体催化肽键合成的是rRNA，蛋白质只是维持rRNA构象，起辅助的作用。 延伸因子是参与蛋白合成过程中肽链延伸的蛋白因子，在原核生物中有三种延伸因子，即EF-Tu、EF-Ts、EF-G。 原核生物蛋白质合成的延伸因子 因子 基因 功能 抑制剂 EF-Tu tufA,tufB 与氨基酰tRNA 黄色霉素 及GTP结合 EF-Ts tsr 结合EF-Tu， 取代GDP EF-G 结合核糖体 梭链孢酸 ?