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色谱的起源 茨维特(Tswett)的实验 茨维特：俄国植物学家，主要从事植色素的研究工作， 在1906 发表的文章中，首次提出色谱的概念。 茨维特的实验 什么是色谱法？ Chromatography 色谱法是一种分离方法。 它的特点是：有两相，一是固定相，一是流动相，两相作相向运动。 将色谱法用于分析中，则称为色谱分析。 因此色谱分析是一种分离、分析法。 色谱法分离原理 当流动相中所携带的混合物流过固定相时，就会和固定相发生作用(力的作用)。由于混合物中各组分在性质和结构上有差异，与固定相发生作用的大小也有差异。因此在同一推动力作用下，不同组分在固定相中的滞留时间有长有短，从而按先后不同的次序从固定相中流出。 气相色谱分离原理 什么是气相色谱法？ 色谱法的分类： 按流动相状态的不同，可分为以下三类： 气相色谱法 (GC) 液相色谱法 (LC) 超临界流体色谱 (SFC) ? 什么是气相色谱法 气相色谱法 以气体为流动相的色谱法 Gas Chromatogaphy，简称GC 按固定相状态的不同可分为： 气固色谱(GSC) 气液色谱(GLC) 其他色谱法简介 按固定相使用的形式可分为 柱色谱（column chromatography） 将固定相装在色谱柱内 纸色谱（Paper Chromatography） 用滤纸做固定相或固定相载体的色谱 薄层色谱（Thin Lay Chromatography） 固定相均匀涂在玻璃板或塑料板上 色谱法基本理论 色谱相关术语 色谱法理论的概况 色谱中的动力学理论 色谱分离情况的评价方法 影响色谱分离的主要因素及条件选择（从理论的角度加以判断） 一、色谱相关术语 关于色谱峰 关于保留值 关于分配平衡 关于色谱峰的术语 关于色谱峰的术语 峰底宽、半峰宽及标准偏差三者的关系为：W=4σ，Wh/2=2.354σ 拖尾峰 前延峰 鬼峰、假峰 畸峰 峰底 基线漂移 基线噪声 谱带扩张 关于保留值的术语 死时间（t0，tM）：无保留组分出峰时间 保留时间（tR）： 调整保留时间（t’R）： 关于保留值的术语 色谱基本理论概述 研究理论的目的 解决色谱峰的分离问题 三个色谱基本理论问题 色谱热力学问题——发展高选择性色谱柱 色谱动力学问题——发展高效能色谱柱 分离条件的最优化问题——分离条件优化 色谱动力学理论 研究流出曲线展宽的本质及曲线形状变化的影响因素 塔板理论 速率理论 塔板理论 塔板理论将色谱柱比作精馏塔，通过概率理论得到流出曲线方程： 塔板理论 当t=tR时，C=Cmax，峰高正比于进样量W，是峰高定量的理论基础。 当n越大，柱效越大，Cmax/W越大。即保留时间一定时，塔板数越多，峰越高。 Cmax反比于tR，tR小，Cmax大， 保留时间小的组分峰高且窄。tR大，Cmax小， 保留时间大的组分峰低且宽。 柱效 由流出曲线方程导出： H=L/n 柱效 n是峰相对展宽的量度 n是柱效的量度 n是常数时，Y与tR 成正比 n越大，h越小，表明组分在柱中达到的分配平衡次数越多，对分离越有利，但还不能预言各组分有被分离的可能性。 塔板理论的贡献 塔板理论有助于我们形象的理解色谱的分离过程。 导出色谱流出曲线方程，它符合高斯分布，与实验现象相吻合。 导出理论塔板数的计算公式，作为柱效的评价指标。 塔板理论的局限 塔板高度H是一个抽象的物理量，它的色谱本质是什么？它与哪些参变量有关，又怎样影响峰的扩张？对实验的指导意义有限。 不能解释流速对理论塔板数的影响。 有些假设不合理，如没有考虑纵向扩散对色谱分离的影响等。 速率理论 速率理论是1956年荷兰学者Van Deemter等提出，因此又称作范第姆特方程 运用流体分子规律研究色谱过程中产生色谱峰扩展的因素，导出了理论塔板高度与流动相线速度的关系，揭示了影响塔板高度的动力学因素 速率方程的导出 根据塔板计算公式： n=5.54(tR/Wh/2)2 速率理论讨论的是色谱峰展宽原因，即影响塔板数n的因素，也就是影响塔板高度H的因素。 速率方程的表达式 A项: 涡流扩散项 A=2λdp 涡流扩散项 涡流扩散项A：由不等路径造成的色谱峰扩展。由于柱填料粒径大小不同，粒度分布范围不一致及填充的不均匀，形成宽窄、长短不同的路径，因此流动相沿柱内各路径形成紊乱的涡流运动，有些溶质分子沿较窄且直的路径运行，以较快的速度通过色谱柱，发生分子超前，反之，有些分子发生滞后，从而使色谱峰产生扩散。其中毛细柱A=0 B项: 分子扩散项 B/u B=2γDg 分子扩散项 分子扩散项：由于分子的纵向扩散造成的色谱峰扩展。即由于