原创力文档- 1、本文档共26页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
ctDNA液体活检技术体系—EGFR血浆—20150811.—山东德信医疗科技
为真医药 400-691-0280 4008-850-650 为真医药 400-691-0280 4008-850-650 为真医药 400-691-0280 4008-850-650 为真医药 400-691-0280 4008-850-650 CtDNA 液体活检技术平台介绍 机密材料，非允勿转 MCA-qASA血浆突变检测技术 目 录 MCA-qASA 体系组成 MCA-qASA 血浆突变检测体系： Mag@MutiCollect血浆游离DNA靶向捕获技术 ACA-qMCA荧光定量PCR技术 Mag@MutiCollect ACA-qMCA assay ACA-qMCA设计原理：Blocker + AMRS + qMCA 突变偏向扩增系统（AMRS） PCR引物的3端位必须和突变扩增子匹配，而野生不匹配 实时偏向PCR反应 熔解曲线分析（Melting Curve Analysis） 荧光vs温度作图得到DNA熔解曲线 DNA溶解曲线是DNA序列的“指纹” 核酸blocker阻滞野 生扩增 设计野生匹配blocker 阻滞对野生片段扩增 MCA-qASA：三种已有技术的有机结合。 MCA-qASA 检测技术简介 1、独家知识产权的血浆突变检测技术平台； 2. 样本前处理的独家技术，包括自有ctDNA提取，效果是Roche或Qiagen同类试剂盒2-3倍，靶向富集技术等； 3、国内唯一经大规模双盲临床验证的血浆突变检测技术平台。 MCA-qASA 特点优势 高效率的ctDNA靶向富集提取体系：Mag@MutiCollect 特异性引物3端的特异性修饰等独特设计，具有比ARMS更高的特异性； Blocker可以偏向性阻滞野生型片段的扩增，进一步提高特异性和灵敏度； 引物扩增区域在60-90bp范围内，更适合碎片化的ctDNA； 灵敏度在0.05%~0.1%。 技术示意图（部分） Mag@MutiCollect：大大提高靶向ctDNA富集效率 Mag@MutiCollect原理 利用氧化还原法制备得到粒径均一的磁性纳米微粒，修饰功能基团，依据靶向DNA，针对性在磁性纳米微粒藕联相辅DNA制备磁性纳米微球探针，可以直接从血浆中快速高效富集靶向DNA片段。 纳米磁珠探针修饰方案 Mag@MutiCollect血浆游离DNA靶向捕获技术 实验方案： 取4个人的血浆，每个血浆平均分为2份，每份血浆500 uL，1份使Mag@MutiCollect 靶向捕获，1份使用Blood Virus Mini Kit（Qiagen）提取。 Mag@MutiCollect 靶向捕获技术 Qiagen试剂盒 引物设计: 与ARMS引物相比，极大提高灵敏度和特异性 与ARMS原理不同，MCA-qASA体系中
文档评论（0）