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X34011基因工程的基本内容(汪娜)
第二节 基因工程简介 武汉二中 汪娜 青霉菌能产生对人类有用的抗生素——青霉素 豆科植物的根瘤能够固定空气中的氮气 家蚕能够吐出蚕丝为人类利用 能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮?让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物?…… 设想 诱变育种? 杂交育种? 多倍体育种? 单倍体育种? 胰岛素基因 固氮基因 经过多年的努力,科学家于20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术——基因工程。 固定氮气 生产人胰岛素 基因工程:在生物体外,通过对DNA分子进行人工“剪切→拼接”,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进行无性繁殖,使重组基因在受体细胞内表达,产生出所需要的基因产物。 基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 结果 生物体外 基 因 DNA分子水平 人类需要的基因产物 剪切→拼接→导入→表达 基因工程过程示意图 ①从细胞中分离出DNA ① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ②限制酶截取DNA片断 ③分离大肠杆菌中的质粒 ④ DNA重组 ⑤用重组质粒转化大肠杆菌 ⑥培养大肠杆菌克隆大量基因 基因的大小以纳米计算,要对它进行剪切、拼接等操作,没有非常精细的工具是不行的。 1. 基因工程的 指“ 限制性内切酶 ” 微生物 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定切点切割 已发现的有200种 种类: 来源: 特点: “ ” eg: 大肠杆菌(E.coli)的一种限制酶(EcoRI)能 识别GAATTC序列,并在G和A之间切开。 几种常见限制性内切酶 2.基因工程的 指“DNA连接酶” “ ” 作用: 连接“梯子”断口的“扶手”而非“梯子”中间的“踏板” DNA连接酶的作用过程 目的基因 3.基因工程的 (1)?运载体作用:将外源基因送入受体细胞,并且携带目的基因在宿主内大量增殖 (2)运载体的条件 ①?能在宿主细胞内复制并稳定地保存 ②?具有多个限制酶切点——多克隆位点 ③带有筛选标记基因 eg:抗菌素的抗性基因,产物具有颜色的基因(绿荧光蛋白gfp) (3)运载体种类:质粒、噬菌体、动植物病毒 存在于细菌、酵母菌和放线菌等生物中,是细胞染色体以外能够自主复制的很小的DNA分子。绝大多数细菌质粒都是闭合环状DNA分子。 DNA 质粒 电镜下的质粒 质粒 ②特性: ①概念: 质粒是基因工程最常用的运载体。 a, 含有控制着抗药性等性状的基因。· b,有的细菌有一个质粒,有的细菌中有多个质粒。一般来说质粒的存在对宿主细胞的生存无太大影响。但是质粒的复制只能在宿主细胞内完成。 基因的“剪刀” 基因的“针线” 基因的运输工具 基因操作的工具 ——限制性内切酶 ——DNA连接酶 ——运载体 1.以下有关基因工程的叙述,正确的是 ( ) 2.下列关于限制酶的说法不正确的是( ) A.限制酶广泛存在于各种生物中,微生物中很少分布 B.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 C.不同的限制酶切割DNA的切点不同 D.限制酶的作用是用来提取目的基因 A、基因工程是细胞水平上的生物工程 B、基因工程的产物对人类都是有益的 C、基因工程产生的变异属于人工诱变 D、基因工程育种的优点之一是目的性强 4.下列黏性末端属于同一种限制性内切酶切割的是( ) A.①② B.①③ C.②④ D.③④ 3.下图是基因工程主要技术环节的一个基本步骤,这一步需用到的工具是( ) A.DNA连接酶和解旋酶 B.DNA聚合酶和限制性核酸内切酶 C.限制酶和DNA连接酶 D.DNA聚合酶和RNA聚合酶 5. 下列高科技成果中,根据基因重组原理进行的是( ) ①我国科学家袁隆平利用杂交技术培育出超级水稻 ②我国科学家将素云金杆菌的某些基因移植到棉花体内③我国科学家通过返回式卫星搭载种子培育出太空椒 ④我国科学家通过体细胞克隆技术培养出克隆牛 A、① B、①② C、 ① ②③ D、②③④
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