艾滋病检测技术新进展【ppt课件】.ppt

艾滋病检测技术新进展及其应用 郭志宏 浙江省疾病预防控制中心 内容提要 1.HIV急性期感染或窗口期感染检测（Ab/Ag联合检测和集合PCR） 2.婴幼儿早期诊断 （nest RT-PCR） 3.快速检测策略及质控 HIV血清阳转窗口期 从感染HIV到抗体呈阳性反应 这段时间血浆中含有高浓度HIV RNA 有很高的传染性 现在普遍认为2周～3个月,个别案例达6个月。 HIV感染各种检测方法的窗口期 HIVAb检测（第三代试剂）：窗口期约28天 HIVAb/Ag联合检测（第四代试剂）：窗口期约15天 核酸检测： 窗口期约10天 HIV急性期感染或窗口期感染检测方法 1.Ab/Ag联合检测: ELISA 2.HIV RNA检测: 集合PCR HIV Ab/Ag联合检测 检测早期HIV感染的效果与单独HIV-1抗原的试剂相当 与RT-PCR方法相比，平均滞后时间是大约3.23天 与第三代抗体试剂相比，窗口期缩短了1.56 到 5.32天 检测献血员的特异性是99.80% 第四代试剂的敏感性和特异性均有所提高 HIV Ab/Ag联合检测试剂的原理 HIV Ab/Ag特点 HIV-Ab与HIV-Ag双检测系统 —HIV-Ag和HIV P24抗体共同包被 —HRP标记HIV-Ag和HRP标记亲和素共同组成酶标试剂 双抗原夹心法测HIV-Ab ——包被抗原+HRP标记抗原 双抗体夹心LAB法测HIV-Ag ——包被抗体＋生物素标记抗体＋HRP标记亲和素 生物素-亲和素反应系统应用 HIV-Ag/Ab试剂对BBI panel检测结果 集合HIV RNA RT-PCR样本的路线 集合的拆分检测路线 应用集合PCR技术发现窗口期感染者 MSM VCT IDU ? 筛查- ? 筛查+ 集合PCR WB ?+ 结合流行病史，判断窗口期感染 婴幼儿HIV感染的诊断 HIV感染产妇生婴幼儿在出生后18个月内可应用HIV核酸检测进行早期HIV感染诊断。 逆转录PCR（RT-PCR）方法，一般需扩增HIV gag 和pol 和env 基因片段。 如果儿童第一次采血时已满12个月，则应首先进行HIV抗体检测。对于抗体阳性者进行HIV核酸检测。如果已满18个月，不做核酸检测。 扩大监测检测覆盖面 要进一步加强监测检测网络建设，依托现有医疗卫生资源，配备必要的设备和人员，扩大检测服务范围，推广使用快速简便的检测方法，提高检测可及性。组织各级各类医疗卫生机构主动开展艾滋病病毒检测咨询。 建立快速检测点，扩大检测覆盖率 我国地域辽阔，在一些有检测需求但尚不具备条件建立实验室的医疗机构、农村乡（镇）卫生院、社区卫生服务中心和艾滋病自愿咨询检测点（VCT）需要建立快速检测点，以扩大检测覆盖面、发现更多的艾滋病病毒感染者。 增加检测可及性是中国控制艾滋病的关键 1.知晓 HIV感染状况能够得到有效的阳性的干预。 2.通过行为改变可以减少2/3的HIV经性传播。 3.及时的抗病毒治疗可以减少病毒载量从而减少二代传播 – “治疗作为预防”—90%以上的效能。 4.如果有60%的HIV+知晓自己的感染状态并获得相应服务——HIV疫情达到控制。 5.为什么目前HIV+发现率不高25%？主动检测的渠道有限（主要通过CDC系统，医院初检阳性的丢失率高），检测过程繁琐（出结果时间太长，二次随访失访）。 云南：快速试剂检测阳性结果与WB结果的符合性 云南：快速试剂检测阳性结果与WB结果讨论 快速试剂应用可缩短服务对象检测结果等待时间，提高初筛阳性结果告知率、CD4细胞检测率、随访率 两种快速检测结果阳性比一种快速检测阳性与确证结果的符合率高。 两种快速试剂检测阳性与确证结果一致率低于替代策略II（两种ELISA检测阳性，S/CO6+快速检测阳性，一致性100%，中国艾滋病性病，2008年第3期） 该比较的局限性：两种快速试剂均为进口试剂，没有对阴性样本进行对比。 部分国产快速检测试剂质量需进一步提高 人员要求 从事HIV快速检测的人员需有相关的检验或医学知识，经过县级以上相关专业技术部门培训，取得合格证书。 未经正规培训或培训后考核未合格的人员,不得进行快速检测工作。 对从事快速检测的人员,应根据需要进行再培训。 检测点的设置 各省可根据艾滋病流行情况和防治工作整体需求，统筹考虑检测点设置，有效开展快速检测。 根据当地艾滋病流行情况和实际需求，可在有检测需求、但不具备建立实验室条件的地方设置检测点。 检测点可由当地艾滋病确证实验室或筛查实验室负责培训、验收，卫生行政部门负责审批，在当地卫生行政部门与省艾滋病确证中心实验室备案。 检测点的要求