临床微生物标本采集运送及处理课件.ppt

1.从4~10 ℃冰箱中取出所需数量的培养基瓶、药敏板，使其在接种前接近室温。 2.旋下外盖，取下橡胶内塞，取100ul加入阴性对照空内； 3.将取样的棉拭子与培养瓶内培养基混匀； 4.混匀后，从瓶内取100ul加到除阴性对照孔外每一小孔中； 5.在每孔正中上方，准确、挤滴加入一滴石蜡油。 6.将药敏板置35 ℃孵育箱中培养24小时后，即可开始观察结果;不见阳性者，则连续培养时间应延长至48小时结束。 注意:应立即接种标本（如果延迟接种，则标本置室温不超过2小时；在4~10 ℃时不超过8小时） * * （二）标本采集 生殖器官标本包括子宫颈、阴道、前列腺；男性及女性外生殖器的分泌物及经血等。应根据感染的部位和可能的病原体决定用于病原学诊断的标本种类、采集部位和采集方法等。阴道、子宫颈及前列腺等分泌物应由医师采集，收集于无菌试管内送检。 尿道分泌物 1.女性尿道：患者排尿1小时后采集，首先拭去尿道口的渗出物；再用拭子通过阴道，靠着耻骨联合，按摩尿道，采集分泌物；如未获得分泌物，清洗外尿道，用灭菌纱布或棉球擦拭，用泌尿生殖道拭子插入尿道2－4cm，旋转拭子2秒。 2. 男性尿道：用泌尿生殖道拭子插入尿道腔2－4cm，旋转拭子，至少停留20秒，而使之容易吸收。 阴道分泌物 擦除过多的分泌物和排出液，用无菌棉拭子采取阴道口内4厘米内侧壁或后穹窿处分泌物，如果需要涂片，需再用一个拭子。 男性前列腺： 用前列腺按摩法采集前列腺液。清洗尿道口，冲洗尿道膀胱，从肛门用手指按摩前列腺，使前列腺液溢出，用无菌容器收集。无肉眼可见脓液时，可用灭菌拭子轻轻伸入前尿道内，旋转拭子采集标本。 （三）注意事项 1.生殖器是开放性器官，标本采集过程中应严格遵 循无菌操作规程以减少杂菌污染。 2.由于阴道正常菌群的存在而使细菌的分离鉴定 受到干扰，所以在采集女性生殖道标本时应注意尽 量减少或避免正常菌群的污染。 3.疑有宫腔感染，如遇产妇需行剖宫产，待胎儿 娩出后取宫腔分泌物，并同时取婴儿耳拭子一同送 检。 4.沙眼衣原体和病毒均在宿主细胞内繁殖，取材 时拭子应在病变部位（移行上皮处稍内）停留十几 秒钟，并采集尽可能多的上皮细胞。 5. 生殖道感染厌氧菌也较多见，疑有厌氧菌感染时，标本采集和运送应避免与氧气接触，最佳方法是床边采样，直接接种至厌氧装置内。 6. 淋病奈瑟菌检查时，取材的深度一定要够，因为淋球菌好发于柱状上皮细胞而不是复层鳞状上皮细胞。不论男女尿道及子宫颈均需用拭子插入尿道及子宫颈3cm深转动并停留10-30s取样送检。 7. 淋病奈瑟菌抵抗力低，对外环境变化颇为敏感，对寒冷和干燥抵抗力很弱。因此，为了保证培养有足够的成功率，取材后要尽快送检，立即接种，标本离体时间越短越好。 直接接种于巧克力培养基，置于5%CO2温箱内，18-24小时后观察。 六、 化脓和创伤标本 组织或器官的化脓性感染，其病原菌的来源可分为两类： ① 内源性：感染源是炎症局部周围器官中的正常菌群，由于损伤等因素进入无菌状态的组织内，发生感染。 ② 外源性：感染源是存在于人体外部自然界的微生物，由于外伤和直接接触通过人体表面进入人体，造成感染。 脓液的细菌学检查对于确定感染的种类（结核性或非结核性等）、提供药物敏感结果和指导临床治疗有重要的意义。 （一）标本采集 1．开放性感染和已溃破的化脓灶 标本采集前先用灭菌生理盐水拭去表面渗出物，尽可能用抽吸或将拭子深入伤口，紧贴伤口前沿取样，从脓肿底部或脓肿壁取样，效果最好。慢性感染，污染严重，很难分离到致病菌，可取感染部位下的组织，研磨成组织匀浆接种于适宜的培养基。 2．封闭性脓肿 局部消毒后用针及注射器抽吸脓肿壁，将所有物质置于无菌试管内送检，疑为厌氧菌感染时立即作床边接种或置于厌氧转运装置送检（针头插一橡皮塞隔绝空气）。但取样时，可能会带入与感染过程无关的定植细菌。 3．大面积创伤感染：可取感染组织块或沾有脓汁的内层敷料送检。 （二）注意事项 细菌对干燥敏感或只能采集少量标本时，用棉拭子采集标本后立即放入液体培养基内，或采标本前先将棉拭子沾少许肉汤以保持标本湿度。 对于不能立即送检的标本，应放4℃保存，培养淋病奈瑟菌和脑膜炎奈瑟菌的标本除外。 尽可能在用药前采集标本。 采样前病灶局部应避免用抗菌药物或消毒剂。 革兰染色对标本进行评估。涂片中如出现上皮细胞提示标本已被污染。没有上皮细胞而有白细胞说明标本采集正确。 有的创伤均可有细菌污染，但不一定发生感染，因此对分离到的细菌要根据创伤的情况、菌量和种数，收集标本的处理过程、机体免疫力及抗生素的使用情况等多种因素来分析判断。 标本处理 直接涂片，做出初步判断；