生化分析携带污染的发现与排除.pptx

生化分析携带污染的发现与排除;;引起携带污染的原因;原因二 生化仪状态不良，使用不当： ①、清洗力的低下（日常维护欠缺，仪器老化） ②、生化仪内污垢的积聚 ③、测试顺序安排不当 常规清洗不能有效的消除污染 携带污染 ;;一、试剂针携带污染;原因二 从各个项目设置的参数可知，试剂体积量远大于样本体积量。 因此试剂针携带污染影响程度会高于样本针携带污染。 ;试剂针携带污染的类型;部分常用试剂间可能产生的干扰如下： 1.pH值改变：试剂中反应缓冲液之间因仪器携带污染而使下一反应的pH值改变，使下一反应达不到最佳状态。如双缩脲法测血清总蛋白，若其他条件相同，反应在碱性(pH值8-9)条件时，蛋白肽键（—CONH）才都能与碱性铜溶液作用生成紫色反应，完全测出血清蛋白的总量。若pH＜8时，总蛋白测定结果偏低，直接影响球蛋白、白蛋白/球蛋白的结果。酶活力测定在最适pH值时，反应最快，灵敏度最高，但是因为缓冲能力有限，可因携带污染使酶促反应出现无效值。大多数酶反应pH值在6.0-7.5之间；ALP、γ-GT、LDH须在碱性条件下最适宜。 ;2.TG、T-CH、UA、MG试剂中含有胆酸盐，对循环酶法测定胆汁酸能产生严重干扰。 3.ALT（IFCC）、AST（IFCC）试剂中含有高活力LD成分，有可能会对LD的测定带来干扰。 4.CK（NAC-activated）、CK-MB（NAC-activated）试剂中含有Glu成分，其分析方法的原理中包含Glu的已糖激酶(HK)反应过程，因此可能对Glu测定带来干扰，尤其对Glu的HK法测定可能带来严重干扰。 ;5.Glu(HK)、CK（NAC-activated）、CK-MB（NAC-activated）、TG、HDL-C、LDL-C(直接法)等试剂中使用了镁盐，可能会对其后的Mg2+ 测定带来干扰；TP试剂中高浓度的Cu2+对Mg2+测定也会产生干扰。 6.ChE(Butyrylthiocholine)、TC(ChOD-PAP)、Glu(GOD-PAP)、 UA(Uricase)、 α-HBDH(DGKC)等试剂使用磷酸缓冲液，可能会对无机磷的测定带来干扰。 ;7.Mg2+试剂 (Calmagite)中含有EDTA成分，为Ca2+络合剂，可能对Ca2+的测定带来干扰。 8.CK检测不应在ALP、Ca检测之前，因CK反应液中加入EDTA-Na，能抑制ALP活性，结合Ca而使结果偏低。 9.BUN酶法测定因谷氨酸脱氢酶（GLDH）消耗NADH，不能放在底物NADH如ALT、AST项目前检测。 ;试剂针携带污染排查和发现; 2、原理 通过设置特定的标本检测顺序，每个样本只做一个项目的检测，可以控制不同项目的先后吸取顺序，实现任何一个项目都能与其他项目相遇。 为了有效评价项目之间携带污染影响程度，污染实验所用的病人样本的混合血清应尽量包含医学决定水平浓度。 ;试剂针携带污染实验方法一;测试顺序号;表2 各项目单独测试5次时测试结果列表，数字代表对应检测项目的测试结果;表3 项目之间交叉列表 纵向代表施污染项目 横向代表受污染项目;携带污染实验结果分析;2、确认实验;确认实验;确认实验;试剂针携带污染实验方法二;测试顺序号;表2 各项目测试10次时测试结果列表，数字代表对应检测项目的测试结果;表3 项目之间交叉列表 纵向代表施污染项目 横向代表受污染项目;实验结果分析(方法二);2、确认实验;确认实验;确认实验;二、样本针携带污染;局限性：结果与选择的标本浓度有关系 例1：选择高浓度的ALT样本浓度值为2020U/L，低浓度ALT样本第一次检测结果为40U/L，第三次检测结果为20U/L。 通过计算携带污染率：Q=(40-20)/2000*100%=1%。 例2：选择高浓度的Cl样本浓度值为140mm/L，低浓度Cl样本第一次检测结果为86mm/L，第三次检测结果为80mm/L 。 通过计算携带污染率：Q=(86-80)/60*100%=10%。 上例中，例1的携带污染率只有1%，由于结果正好在医学决定水平附近，因此对临床判断有较大影响。例2的携带污染率尽管达到了10%，但是对临床判断不会产生大的影响。因此，使用该方法评价样本针携带污染需考虑样本的实际浓度。 ;方案二： 方法：收集高浓度样本H和低浓度样本L，将高浓度样本H等体积分成10个高浓度样