人教版教学课件[名校联盟]吉林省东辽县第一高级中学高中生物人教版选修3《11 基因工程工具》课件.ppt

定向基因改造设想 “分子手术刀”—限制性核酸内切酶 （又称限制酶） 限制酶的识别特点 以中轴线双侧的DNA上碱基呈反向对称，重复排列 如：GAA TTC CCC GGG CTT AAG GGG CCC 分子缝合针—DNA连接酶???  ①连接的部位： ②结果： ③分类： 分子运输车—载体 1.种类：质粒、λ噬菌体的衍生物和动植 物病毒。 2.条件： 3.作用： 质粒的特点 细胞染色体（或拟核DNA分子）外能自主复制的小型双链环状DNA分子； 质粒的存在对宿主细胞无影响； 3.质粒的复制只能在宿主细胞内完成。 * * The camelecow 设想一 能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮？ 能否让细菌“吐出”蚕丝？ 设想二 能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物？ 设想三 经过多年的努力，科学家于20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术——基因工程。 什么叫基因工程？ 基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术。该技术是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物。 （一）基因工程的概念 （一）基因工程的概念 结果 基本过程 操作水平 操作对象 操作环境 基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 人类需要的基因产物 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 基因工程培育抗虫棉的简要过程： （一）基因工程的概念 普通棉花(无抗虫特性) 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株(有抗虫特性) 上述培育抗虫棉的关键步骤是什么？ 重组DNA 导入 形成 （一）基因工程的概念 基因工程培育抗虫棉的关键步骤： 关键步骤一： 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内提取出来 关键步骤二： 形成重组DNA 关键步骤三： 重组DNA导入受体(棉花)细胞 解决培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？ （二）基因操作的工具 关键步骤一的工具： 关键步骤二的工具： 关键步骤三的工具： 分子手术刀— 限制性核酸内切酶 分子缝合针—DNA连接酶 分子运输车—载体 1.分布： 主要在原核生物中。 2.特点： 特异性，即识别特定核苷酸序列，在特定的切点切割。 3.结果： 产生黏性末端和平末端 （二）基因操作的工具 GAATTC CTTAAG G AATTC CTTAA G 黏性末端 中心轴线 CCC GGG GGG CCC CCC GGG GGG CCC 平末端 EcoRI （在G和A之间切割) SmaI （在G和C之间切割） 什么叫黏性末端？ 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？ 要切两个切口，产生四个黏性末端。 如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？ 会产生相同的黏性末端，然后让两者的黏性末端黏合起来，就似乎可以合成重组的DNA分子了。 基因的针线：DNA连接酶 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 同种限制酶切割 分子缝合针——DNA连接酶 （二）基因操作的工具 DNA连接酶可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来，是把梯子两边扶手的断口连接起来，这样一个重组的DNA分子才能形成。 A A T T G C C T T A A G （二）基因操作的工具 磷酸和脱氧核糖之间的键 磷酸二酯键 将两个相同的末端连接。 E·coli DNA连接酶 T4 DNA连接酶 ?? 外源基因(如抗虫基因)怎样才能导入受体细胞(如棉花细胞)？ （二）基因操作的工具 导入过程需要运输工具——载体。 　　 将外源基因送入受体细胞; 利用运载体在受体细胞（棉花细胞）内，对外源基因（抗虫基因）进行大量复制 作为运载体必须具备哪些条件？ （二）基因操作的工具