微生物染色法 培养基与试剂 2.doc

微生物染色法 培养基和试剂 2 4.24　麦康凯琼脂 　　4.24.1　成分 　　蛋白胨　　　　　　　　　　 17g 　　脙胨　　　　　　　　　　　 3g 　　猪胆盐(或牛、羊胆盐)　　　 5g 　　氯化钠　　　　　　　　　　 5g 　　琼脂　　　　　　　　　　　 17g 　　蒸馏水　　　　　　　　　　　1000mL 　　乳糖　　　　　　　　　　　　10g 　　0.01%结晶紫水溶液　　　　　 10mL 　　0.5%中性红水溶液　　　　　　5mL 　　4.24.2　制法 　　4.24.2.1　将蛋白胨、胨、胆盐和氯化钠溶解于400mL蒸馏水中，校正pH7.2。将琼脂加入600mL蒸馏水中，加热溶解。将两液合并，分装于烧瓶内，121℃高压灭菌15min备用。 　　4.24.2.2　临用时加热溶化琼脂，趁热加入乳糖，冷至50～55℃时，加入结晶紫和中性红水溶液，摇匀后倾注平板。 　　注：结晶紫及中性红水溶液配好后须经高压灭菌。 　　4.25　伊红美蓝琼脂(EMB) 　　4.25.1　成分 　　蛋白胨　　　　　　　　　　　 10g 　　乳糖　　　　　　　　　　　　 10g 　　磷酸氢二钾　　　　　　　　　 2g 　　琼脂　　　　　　　　　　　　 17g 　　2%伊红Y溶液　　　　　　　　　20mL 　　0.65%美蓝溶液　　　　　　　　10mL 　　蒸馏水　　　　　　　　　　　 1000mL 　　pH7.1 　　4.25.2　制法 　　将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中，校正PH，分装于烧瓶内，121℃高压灭菌15min备用。临用时加入乳糖并加热溶化琼脂，冷至50～55℃，加入伊红和美蓝溶液，摇匀，倾注平板。 　　4.26　三糖铁琼脂(TSI) 　　4.26.1　成分 　　蛋白胨　　　　　　　　　　　　　　　　　　 20g 　　牛肉膏　　　　　　　　　　　　　　　　　　 5g 　　乳糖　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 10g 　　蔗糖　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 10g 　　葡萄糖　　　　　　　　　　　　　　　　　　 1g 　　氯化钠　　　　　　　　　　　　　　　　　　 5g 　　硫酸亚铁铵〔e(NH4)2(SO4)2·6H2O〕　　　　　0.2g 　　硫代硫酸钠　　　　　　　　　　　　　　　　 0.2g 　　琼脂　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 12g 　　酚红　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 0.025g 　　蒸馏水　　　　　　　　　　　　　　　　　　 1000mL 　　pH7.4 　　4.26.2　制法 　　将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中，校正pH。加入琼脂，加热煮沸，以溶化琼脂。加入0.2%酚红水溶液12.5mL，摇匀。分装试管，装量宜多些，以便得到较高的底层。121℃高压灭菌15min。放置高层斜面备用。 　　4.27　三糖铁琼脂(换用方法) 　　4.27.1　成分 　　蛋白胨　　　　　　　　　 15g 　　脙胨　　　　　　　　　　 5g 　　牛肉膏　　　　　　　　　 3g 　　酵母膏　　　　　　　　　 3g 　　乳糖　　　　　　　　　　 10g 　　蔗糖　　　　　　　　　　 10g 　　葡萄糖　　　　　　　　　 1g 　　氯化钠　　　　　　　　　 5g 　　硫酸亚铁　　　　　　　　 0.2g 　　硫代硫酸钠　　　　　　　 0.3g 　　琼脂　　　　　　　　　　 12g 　　酚红　　　　　　　　　　 0.025g 　　蒸馏水　　　　　　　　　 1000mL 　　pH7.4 　　4.27.2　制法 　　将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中，校正pH。加入琼脂，加热煮沸，以溶化琼脂。加入0.2%酚红水溶液12.5mL，摇匀。分装试管，装量宜多些，以便得到较高的底层。121℃高压灭菌15min，放置高层斜面备用。 　　4.28　克氏双糖铁琼脂(KI) 　　4.28.1　上层培养基成分 　　血消化汤(PH7.6)　　　 500mL 　　琼脂　　　　　　　　　6.5g 　　硫代硫酸钠　　　　　　0.1g 　　硫酸亚铁铵　　　　　　0.1g 　　乳糖　　　　　　　　　5g 　　0.2%酚红溶液　　　　　5mL 　　4.28.2　下层培养基成分 　　血消化汤(pH7.6)　　　 500mL 　　琼脂　　　　　　　　　2g 　　葡萄糖　　　　　　　　1g 　　0.2%酚红溶液　　　　　5mL 　　4.28.3　制法 　　4.28.3.1　取血消化汤按上层和下层的琼脂用量，分别加入琼脂，加热溶解。 　　4.28.3.2　分别加入其他各种成分。将上层培养基分装于烧瓶内；将下层培养基分装于灭菌12mm×100mm试管内，每管约2mL。115℃高压灭菌10min。 　　4.28.3.3　将上层培养基放