免疫学东南大学课件第四章_免疫球蛋白.ppt

实验室工作汇报 第四章 免疫球蛋白 免疫球蛋白研究简史（1） 1890年：（德）Behring和（日）北里发现减毒白喉外毒素免疫动物血清中的抗毒素，以后科学家先后发现杀菌素、溶菌素等，30年代统称为Ab。 1937年Tiselius用电泳方法将血清蛋白分成四个组分：白蛋白、α球蛋白、β球蛋白、γ球蛋白。免疫血清的γ峰很高。证实了抗体活性存在于血清γ球蛋白部分。 γ球蛋白（丙球）=抗体 1968年和1972年，WHO先后决定：将具有抗体活性或化学结构与抗体相拟的球蛋白统称为免疫球蛋白Immunoglobulin，Ig。sIg(secreted ,Ig)mIg(membrane,Ig)抗体(antibody,Ab)：B细胞识别抗原后增殖分化为浆细胞所产生的一种蛋白质。主要存在于血清等体液中，能与相应抗原特异性地结合，具有免疫功能。 1959～1962年?Porter（英）and Edelmen（美）应用酶和还原剂以消化和解离方法阐明了Ig基本结构，获1972年诺贝尔奖。 1975年德国学者Kohler和英国学者Milstein利用细胞融合技术首次成功地制备了单克隆抗体（Monoclonal Antibody, McAb）为此他们获得了1984年诺贝尔奖。 1976年Hozumi和Tonegawa应用分子杂交技术克隆出编码Ig分子可变区（variable region,V区）和恒定区(constant region,C区)基因，证明了两个基因编码一条肽链，以及B细胞在发育过程中基因重排现象，阐明了抗体多样性的遗传学基础。为此获得了1987年诺贝尔奖。 1984年国外首次报道人-鼠嵌合抗体成功地在骨髓瘤细胞内表达，开创了基因工程抗体技术。 1991年将噬菌体展示技术引入抗体库的构建，从而出现了噬菌体抗体库技术。 一、免疫球蛋白的基本结构二、免疫球蛋白的其他成分三、免疫球蛋白的水解片段 一、免疫球蛋白的基本结构(1) 由多肽和碳水化合物组成的糖蛋白。Ig都是对称性的高分子。 2H链 2L链 二硫键 J链 分泌片 一、免疫球蛋白的基本结构(2) 四条肽链的对称性结构： 2H链（heavy chain）：长、450-550个aa、分子量50KD-75KD，由链间二硫键相连呈Y字形。 2L链（light chain）：短，214个aa，分子量25 kD，在羧基末端以二硫键与相对的重链相连。 2、分类、亚类、型、亚型 一、免疫球蛋白的基本结构(3) H链：根据恒定区（Fc）氨基酸组成及序列差异，其Ag性也不同。根据抗原性的差异Ig分为五类： γ（gamma）链－IgG －单体 α （alpha）链―IgA―单or?二聚体 μ（mu）链―IgM―五聚体 δ （delta）链―IgD―单体 ε（epsilon）链―IgE―单体 一、免疫球蛋白的基本结构(3) 同类Ig分子可根据H链氨基酸组成及序列的不同，即抗原性的微小差异，以及H链之间二硫键的数目和连接位置不同而分成若干亚类。 人IgG：IgG1、IgG2、IgG3 、IgG4 IgA：IgA1、 IgA2 一、免疫球蛋白的基本结构(3) L链：根据恒定区氨基酸组成及抗原性的不同： K型（Kappa）： 65%（人）97%（小鼠） 入型（Lambda） 35% （人）3%（小鼠） 每－Ig分子中的二条L链型别相同。同一个体中可同时存在两种L链型别的Ig κ：λ=2：1(人)；20：1（小鼠） Ig轻链近N端稳定区氨基酸排列有差异分亚型：λ1λ2λ3λ4。 一、免疫球蛋白的基本结构(4) V（可变）区（Variable region）： C（恒定）区（constant region）： 超变区（hypervariable region，HVR）或互补决定簇区(complementarity determining region,CDR) ；独特型决定簇(idiotypic determinants) 骨架氨基酸残基：结构较稳定。或称支架区，主要是稳定CDR的空间构型，以利IgCDR与抗原决定簇精细的特异性结合。 铰链区（hinge region） 位于CH1和CH2之间，富含脯氨酸，易发生伸展和一定程度的移动。 ①Ig分子变构有利于抗原结合部位与不同距离的特异性抗原互补结合。 ②易使补体结合点得以暴露，为补体活化创造了条件。 ③展开的链也易受蛋白酶水解而断裂成较小的片段。 免疫球蛋白的功能区(结构域） Ig分子通过链内二硫键折叠或若干个能行使特定功能的球形单位，每个球形单位为一个功能区。 功能区的作用 V区 VL+VH功能区：抗原结合部位 单体、二聚体