靶向性CIK治疗乙肝新模式课件.ppt

乙肝治疗的新模式 ——靶向性CIK治疗肝病技术 一、乙肝的流行现状 乙型肝炎病毒(HBV)感染呈全球性分布 我国乙肝的流行现状 携带者是否需要治疗 乙肝病毒携带者是乙肝病毒赖以生存和繁殖的宿主，是乙肝的重要传染源。 绝大多数乙肝病毒携带者的肝脏都有轻或重的炎性改变，但因为肝脏自身的代偿能力很强，所以肝功上表现为正常；对携带者进行肝穿活检，发现70%为轻型肝炎或非特异性炎症反应，20%为明显活动型肝炎，有的甚至已有肝纤维化、肝硬化，仅10%肝组织正常。 美国的资料显示：5岁前与5岁后感染HBV的携带者，肝硬化肝癌的发病率分别为25%和15%。 慢性乙肝携带者也需要积极治疗。 二、乙肝的治疗现状 乙肝病毒耐药变异的累计发生概率 (阿德福韦或拉米夫定单药治疗) 乙肝病毒基因突变与疾病的关系（a） 乙肝病毒基因突变与疾病的关系（b） 慢性乙肝患者的免疫状态 慢性乙型肝炎患者机体呈现一种免疫耐受状态，表现为免疫应答水平低下或免疫功能缺失，尤其表现在抗原呈递细胞--树突状细胞（DC)。 造成这种免疫耐受的原因是患者体内树突状细胞抗原呈递功能的缺陷，所以不能把病毒抗原的信号传递给机体的免疫系统，从而不能诱发特异性的CD8+CTL反应。 三、乙肝治疗的新模式 ——靶向性CIK治疗技术 过继免疫治疗中的CIK治疗方法 细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine induced killer，CIK）是一种非MHC限制性的高效溶肿瘤细胞毒性T细胞。 CIK在外周血淋巴细胞中的比例为1%～5%，经大量扩增具有杀伤肿瘤和病毒的活性，是目前最新、疗效最好的免疫治疗手段。 国际国内应用CIK细胞治疗技术已经非常成熟。在我国，多家医疗机构都将其用于治疗肿瘤和病毒性疾病。 树突状细胞(DC)的作用 功能最强的抗原递呈细胞,能摄取、加工、及递呈抗原。 缺乏其他任何刺激因子的条件下启动T细胞介导的应答。 将抗原递呈给T细胞，经T细胞识别后即启动MHCI类限制性细胞毒性T细胞应答和MHCII类限制性T辅助细胞的应答。此外，DC还高水平的的表达一系列共刺激分子，如CD80、CD86、CD40等，可介导DC与T细胞结合 。 DC用于病毒的免疫治疗主要是通过体外病毒抗原冲击致敏DC-CIK，再回输体内，诱导出病毒抗原特异性CTL，清除病毒和杀伤病毒感染的细胞。 靶向性CIK的治疗机理 免疫细胞能以不同的机制识别病毒感染细胞,通过直接的细胞质颗粒穿透封闭的细胞膜进行胞吐，实现对病毒感染细胞的裂解； 通过诱导细胞凋亡杀伤病毒感染细胞； 使用乙肝病毒特异性抗原，在DC呈递抗原的作用下，使CIK细胞成为特异性杀伤乙肝病毒的CTL； CTL分泌IL-2、IL-6、IFN-γ等多种抗病毒的细胞因子； CTL细胞释放的某些颗粒酶通过非穿孔素依赖途径进入靶细胞内，直接杀灭胞内病毒； 免疫细胞回输后可以绕过体内种种免疫障碍，从而选择性地操作抗病毒免疫反应； 激活机体免疫系统，提高机体的免疫功能； 免疫细胞的体外活化、扩增可避免体内大量应用一些免疫制剂带来的严重毒性反应。 CIK的特点和优势 增殖速度快； 杀病毒活性高； 使用了特异性抗原，可以靶向性杀灭病毒； 对耐药病毒同样敏感； 杀伤活性不受CSA、FK506等免疫抑制剂的影响； 对正常骨髓造血前体细胞毒性很小； 细胞的记忆性和长寿命，可以长期在体内发挥特异性免疫应答； 非溶胞机制的存在，可以在清除病毒、消除炎症的同时大大降低对感染细胞的损伤。 四、靶向性CIK技术方法 (一) 技术开展条件 设备、材料和试剂 千级超洁净工作间、百级超洁净工作台 大容量低温离心机、CO2培养箱、倒置显微镜、血细胞分离机、流式细胞仪、化学发光免疫分析仪、彩色多普勒、全自动血液生化分析仪、酶标仪、DNA分析仪、基因突变检测系统 大容量培养瓶、细胞培养基 GM-CSF、 IL-4、 IL-2、INF-γ、IL-1、抗CD3单抗等 机构、人员和管理 符合国家非血缘造血干细胞采集和移植技术管理规范 医疗机构基本要求 人员基本要求 技术管理基本要求 其他管理要求 (二)靶向CIK治疗乙肝的流程 筛选适合CIK治疗的患者 治疗前检查 （三）治疗效果 病毒学指标 病毒学指标 血清学指标 HBsAg定量指标在疗程中的变化情况 血清学指标 HBeAg (+)患者血清学应答情况 肝功指标 ALT超过正常值的患者治疗有效率统计 肝功指标：A/G 所有的纳入治疗病例在治疗第二十周，即一个周期结束后未见头疼，皮疹，胃肠道反应等。 其中少量患者出现低热，体温为37.5℃以下，均在6h内恢复正常。 在治疗过程中，有个别谷丙转氨酶一过性升高。 总 结 利用靶向性CIK治疗慢性乙型肝炎患者二十周后, 病人