流式细胞术系列之白血病免疫分型课件.pptVIP

流式细胞术在白血病免疫分型中的应用 标本来源 （1）外周血 （2）骨髓穿刺液， （3）骨髓活检标本 （4）淋巴组织穿刺 样本保存 要 求： 室温条件(16℃ -28℃ )存放； 如非液态标本，则要在标本中加入足量的等渗液体（如 生理盐水或组织培养液）。 保存时间 肝素抗凝的外周血和骨髓标本，存放时限为48～72小时； EDTA抗凝标本，存放时限只有12 ～ 24小时，因为髓细胞在此条件下会裂解； 柠檬酸（ACD）抗凝的外周血标本可存放72小时以上。但此方法不推荐用于骨髓穿刺标本，因为高浓度的ACD会引起pH值变化而导致骨髓细胞死亡 正常骨髓流式分析图 CD45/SSC 图中可见： CD45 强阳性SSC 低信号的细胞群为淋巴细胞(褐色细胞群体) 中等强度的CD45 表达SSC 信号最强的细胞群体为粒细胞(蓝色及红色细胞群体) CD45 表达与SSC 信号介于淋巴细胞与粒细胞之间的是单核细胞群体(绿色细胞群体) CD45 阴性SSC 信号最低的有核红细胞和细胞碎片 根据骨髓细胞CD45/SSC 图中分布情况设门圈定各类细胞 R1 门为成熟淋巴细胞 R2 门为正常单核细胞位置 R3 门正常粒细胞位置 R4 门为幼稚淋巴细胞出现位置 R5 门为有核红细胞或细胞碎片位置 R6 门为幼稚髓细胞出现位置 白血病细胞通常会在R4 R6 两门位置处出现 T-ALL B-A