分子生物学原理RNA生物合成 .ppt

分子生物学原理 转录 (transcription) 生物体以DNA为模板合成RNA的过程 。 也就是把DNA的碱基序列抄录成RNA的碱基序列。 复制与转录的异同点 一、转录模板 结构基因：strucural gene 能转录出mRNA然后指导蛋白质生成 的部分。 模板链：template strand 可作为模板转录成RNA的一股链。也称作有意义链或Watson链。 编码链：coding strand 相对于模板链的另一股链。也称为反义链或Crick链。 模板: 转录、翻译的序列比较 5’ GCATTAGCTAGCTACTAGC 3’ DNA 3’ cgtaatcgatcgatgatcg 5’ 双链 转录 5’ GCAUUAGCUAGCUACUAGC 3’ mRNA 翻译 N Ala?Leu?Ala?Ser?Try C 肽链 转录的不对称性 不对称转录：asymmetric transcription DNA双链对一个基因而言，一股可转录，另一股不转录。 模板链与编码链相对而言 二、 RNA聚合酶 转录酶：依赖DNA的RNA聚合酶 DNA dependent RNA polymerase DDRP 原核生物的RNA聚合酶 大肠杆菌的RNA聚合酶：?2??’? 其中?2??’称为核心酶：只有转录功能 ?亚基：辨别转录起始点 ? +?2??’=全酶 受利福平或利福霉素（结核菌药物）的特异性抑制。 原核生物的RNA聚合酶 真核生物的RNA聚合酶 三、模板与酶的辨认结合 转录起始中的事件 解链 形成转录空泡 为首的为三磷酸GTP或ATP 转录起始复合物(RNA-聚合酶全酶-DNA-pppGpN’-OH) 第一个磷酯键形成后， ?亚基从转录起始复合物中脱落下来。RNA聚合酶沿DNA链向前移动。 转录的延长 转录的延长是以5’到3’的方向进行的。 (NMP)n+NTP?(NMP)n+1+PPi 以G=C、A=U、T=A碱基配对。 转录完成部分的DNA重新形成双链。 较长的RNA链上有核糖体结合，说明在某些情况下，转录的同时，翻译已经开始进行了。 转录的过程 转录的延长 （三）转录的终止 转录终止：是RNA聚合酶在模板上的某一位置停顿，RNA链从转录复合物上脱离出来。 分为依赖Rho因子的转录终止和不依赖Rho因子的转录终止。 1、依赖Rho因子的转录终止 Rho因子的左右是使RNA-DNA杂化双链的短链变性，从而有利于转录产物从转录复合物中释放出来。 2、非依赖Rho因子的转录终止 不依赖Rho因子的转录终止模式 真核生物转录终止的特点 真核生物mRNA带有聚腺苷酸尾巴的结构，这是转录之后加上的。 在模板链读码框架的3’端之后，常有一组共同序列AATAAA，再下游还有相当多的GT序列，这些序列称为转录终止的修饰点。 转录与复制的相似之处 都以DNA为模板 需要核苷酸作原料，从5’到3’延长；生成磷酸二酯键以连接核苷酸 都遵从碱基配对规律 都需要依赖DNA的聚合酶 产物都是很长的多核苷酸 转录和复制的区别 转录后的修饰 转录生成的RNA，称为初级转录产物。 无论在真核生物或原核生物中，初级转录产物都经过一定程度的修饰加工，才能表现其功能。 帽子结构 真核生物mRNA的转录后加工 5’和3’首尾的修饰 剪接 5’加帽 转录产物的第一个核苷酸pppG水解成5’-ppG或5’-pG 与另一个三磷酸鸟苷生成三磷酸双鸟苷 第二个鸟嘌呤被甲基化 加帽出现在hnRNA中，说明可能在细胞核中完成，并在剪接之前。 3’端加上聚腺苷酸尾巴 真核生物mRNA中poly A的出现是不依赖于DNA模板的。 加入poly A之前，先由核酸外切酶切去3’末端一些过剩的核苷酸，然后加入polyA。 3’端修饰也是在细胞核中，在剪接之前进行的。 Poly A的有无与长短，是维持mRNA作为翻译模板的活性，以及增加mRNA本身的稳定性。 3’端修饰示意图 真核细胞mRNA的剪接 DNA模板与hnRNA是完全配对的，而成熟的mRNA与hnRNA或DNA杂交都只是部分配对。 因此真核生物的基因有断裂性。 断裂基因 真核生物的结构基因，由若干个编码区被非编码区相互间隔开，但又连续镶嵌而成，因此真核生物的基因称为断裂基因。 外显子代表了基因上编码氨基酸的核苷酸序列。 内含子表示相应的非编码序列。 原核生物结构基因是连续的编码序列，不是断裂基因。 内含子的种类 线粒体，叶绿体转录初级rRNA基因 线粒体，叶绿体的mRNA 形成套索状结构的剪接，由SnRNA和核内蛋白形成的核小核糖核酸蛋白来完成。 tRNA基