金黄色葡萄球菌检测课件_1.ppt

金黄色葡萄球菌检测 李华 09预防医学本科班 金黄色葡萄球菌的生物学特性 　 形态与染色? 　　　金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜。 　　　典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8 mm左右，显微镜下排列成葡萄串状。　　 　　　革兰氏染色阳性。 ? ? 　　 　　　　 模式图 扫描电镜图片 ? 　　 典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8 mm左右，显微镜下排列成葡萄串状。 ????????????????????????????????????? 金黄色葡萄球菌的显微照片 ? 　　　金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜。 　　　 ??????????????????????????????????????? 金黄色葡萄球菌革兰氏染色显微照片 金黄色葡萄球菌的扫描电镜照片 ????????????????????????????????????? 金黄色葡萄球菌的透射电镜照片????????????????????? 金黄色葡萄球菌流行病学 金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。金黄色葡萄球菌的流行病学一般有如下特点： 　季节分布，多见于春夏季；中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。此外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%，所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。 金黄色葡萄球菌可通过以下途径污染食品 食品加工人员、炊事员或销售人员带菌，造成食品污染；食品在加工前本身带菌，或在加工过程中受到了污染，产生了肠毒素，引起食物中毒；熟食制品包装不严，运输过程受到污染；奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时，对肉体其他部位的污染。 金黄色葡萄球菌肠毒素形成条件 存放温度，在37°C内，温度越高，产毒时间越短；　　 存放地点，通风不良氧分压低易形成肠毒素； 食物种类，含蛋白质丰富，水分多，同时含一定量淀粉的食物，肠毒素易生成。 金黄色葡萄球菌致病性 金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶。 金黄色葡萄球菌检验 金黄色葡萄球菌的检验 1、样品制备 　　按无菌操作取检样25 g（mL），加入225 mL灭菌生理盐水，固体样品研磨或置均质器中制成1:10样品混悬液。 　　供计数检验时，可按十进位递增稀释法将样品匀液再进行适当稀释。 2、增菌及分离培养 吸取5 mL混悬液，接种于7.5%氯化钠肉汤或胰酪胨大豆肉汤50 mL培养基内，36℃±1℃培养24 h，转种血平板和Baird-Parker平板， 36℃±1℃培养24 h，挑取血平板上金黄色（有时为白色）菌落进行革兰氏染色镜检及血浆凝固酶试验。 金黄色葡萄球菌的检验 细菌的培养 血平板上金黄色葡萄球菌菌落形态 金黄色葡萄球球菌的单个菌落在血平板上呈金黄色，有时也为白色，大而突出、圆形、不透明、表面光滑，周围有溶血圈。 　　 　　在Baird-Parker琼脂平板上菌落呈圆形，表面光滑、凸起、湿 润，直径2～3 mm。灰黑色至黑色，有光泽，常有浅色（非白色）的边缘，周围绕以不透明圈 （沉淀），其外常有一清晰带。当用接种针触及菌落时具有黄油样粘稠感。有时可见到不分解脂肪的菌株，除没有不透明圈和清晰带外，其他外观基本相同。从长期贮存的冷冻或脱 水食品中分离的菌落，其黑色常较典型菌落浅些，且外观可能较粗糙，质地较干燥。 金黄色葡萄球菌 在BP平板上的菌落形态 金黄色葡萄球菌 在甘露醇盐平板上的菌落 金黄色葡萄球菌染色观察 从平板上挑取可疑性菌落进行革兰氏染色，金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性，显微镜下呈葡萄状排列无芽胞、荚膜，直径0.5-1μm。 革兰氏染色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌血浆凝固酶试验 吸取0.5mL兔血浆与0.5mL金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤24小时培养物充分混匀，置36±1°C培养，每隔半小时观察一次，连续观察6小时，出现凝固，即将小试管倾斜或倒置时，内容物不流动，判为阳性。同时做阴阳性对照。 金黄色葡萄球菌耐热核酸酶试验 将24小时肉汤培养物沸水浴处理15min，用接种环划线刺种于甲苯胺兰-DNA平板，36±1°C培养24小时，在刺种线周围出现淡粉色者为阳性。本试验金黄色葡萄球菌为阳性。 耐热核酸酶试验 金黄色葡萄球菌感染图片 金黄色葡萄球菌感染图片