（PPT）上海交通大学医学院附属仁济医院血管外科张岚课件.pptVIP

上海交通大学医学院附属仁济医院 血管外科 张 岚; 静脉血栓栓塞症(VTE)发病率高、危害严重 病因：遗传性、获得性 （FV Leiden突变；AT、PC和PS抗凝蛋白缺陷） ;AT属于丝氨酸蛋白酶抑制物超家族中的一员，是人体抗凝系统中最重要的一种抗凝物质，约占抗凝系统总活性的70% 432个氨基酸组成，相对分子量为58KDa 反应位点区与肝素结合区 分型 I型主要表现为AT抗原（AT:Ag）和活性（AT:A）的同步减少， II型是由于AT结构异常所致。分为RS型（反应位点突变型）、HBS（肝素结合位点变异）和PE（多重变异）等3个亚型; AT基因测序 同源模建 突变质粒构建 蛋白免疫印迹 ELISA 激光共聚焦显影 ;;c.134GA 箭头所示:突变碱基;; 自然界中蛋白质结构骨架的多样性远少于蛋白质序列的多样性 蛋白质三维结构预测中最为可靠和实用的方法 AT13位碱基与82位碱基在10类物种高度保守 通过同源模建，可以将该区碱基进行任意的人为替换，通过软件分析系统计算出一系列静电力的变化情况，为进一步AT构象病的蛋白质功能研究提供理论基础 ;;;;;AT：Ser82Arg与周围原子基团产生碰撞； 分子间静电力作用半径重叠；分子间距离缩短;1：空白对照 2：AT-wt 3：AT-82 4：AT-13 5：AT-double WB显示：AT-82与AT-double细胞裂解中AT:Ag显著上升;用3种不同质粒转染HEK293T分别检测细胞上清液与细胞裂解液中的AT:Ag含量;左图：双突变质粒转染细胞；右图：野生型质粒转染细胞;AT Morioka（C95R） Cys21-Cys95间二硫键消失 Ser82Asn 额外糖基化 Phe299Leu 合成了一种不耐热的杂合性AT蛋白而导致AT缺陷 13387-9delG、T98I和A404T突变 AT蛋白分泌障碍和细胞内快速降解 Leu99Phe AT蛋白分泌障碍和细胞内滞留; AT-c.134GA c.342TG突变体AT在细胞内潴留 AT-c.342TG突变起主导作用;;myZf47PD7pwUY1-rT#)THYNnsS$F5*8EaRfwLwSYq%m-hGuChXOZNfO!U0nD#WzH(I6Sm1Mc3Ivw4KNxI035r7lmEEShu0BHk0M#3+kfj#1DWGsAck4m%Tl2Qt8WOIeNov-QC)2WrKfFX6!Luv1bLZuT39WxKvlbARyshF7MFT4O64XfDwlC$0PH$U+iDu4Jn$La)bm3vRaRFjJDW5DtC#ge%9CQf7L1MAKZ(2!eM9joDZ4RQ4A(kOE1x4opASm9ZVdm(Q35aAaVdgssl6xezCLQ)Xo*IqV#iXMu7(N6va6PqAXWy87N6E3TZ+A$ov8hVMwzAP(iZi1ba1RrsP6jNUkpi2%m*Zbz0WoNyb618gNNjEG8rm!Xd0FGvUd$+b##hyhuz7ZSVM-xCuY4+b4j6Pv-bls*2X#L5+GlBQozCL9VlgksETPTB+U3vr6GaI*$s)AK8r$jwf2!wcbrHmoSxUgyG8SJAEfSuGU6tMYif%PrvvGXxryL)O27I0Kr6a9HRx5Iv1JAXnlfkT6%mX0mmvWlCCAsTMwyHgZdxRxdxthdRXjzoal8fHEHT7ZfsBzxWakUp*K*3n1q(oeFL2H3%JHeep2QkeNZoIm99gA5BAJFfRnf8jiWQTQ0lG+e*0(tdOvZ1g9id)1a0BqE!wP%%0$nTZq2MKT6ozp7Nev4c57mnAE4qukt!L(UAQnzMr)Iol*-EWiTLq2+FU6FRPEA)5Ypv$UTFnnRsSnjs+nItrOmQDlvfjQ*Ndrfsr3r#F4eXxxVZhNaq%Gmj9Ri1Q#fLcBbB)4f#Q6uI!nBjiU0+ij98U58wE%DIg(M)oY!hatAQ9AUJhBpK7K#Z2Wif21vma0uducw!ka9sur88(!q9xfIj#G4kjN+piul00%Fkwj8r1H1$6#y!7GZGJRCPL51cBPK5HTlv#-#Lm)MQOOZcMUGn8)GbF28ApkTQrwv(wEY0WJLDrp8j$t4myJ*l5ig0z9pRySTwpP)jKLtFIJQ8BwJDPeL7Hun7e$BThzRF7ai19yvTQ2tEjaQB6Y-G-!ZAJl*yRmQkseLwwE$rnfIonJSs%RbhiGMHbnVe