60717921.2基因工程基本操作程序.pptVIP

第二节 基因工程的基本 操作程序;;一、目的基因的获取;1、从基因文库中直接获取;提取某种生物的全部DNA;某种生物的单链mRNA;2、人工合成;1、概念：PCR全称为_______________，是一项 在生物____复制___________的核酸合成技术 ; ;PCR扩增仪;具体过程：;二、基因表达载体的构建 ——基因工程的核心;2、基因表达载体的组成：;启动子:位于基因的首端的一段特殊的DNA片断，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得蛋白质。 终止子:位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断，能终止mRNA的转录。 标记基因:其作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将有目的基因的细胞筛选出来。;三、将目的基因导入受体细胞;1、将目的基因导入植物细胞的方法： （1）农杆菌转化法 ;③过程：;（2）基因枪法 （3）花粉管通道法;2、将目的基因导入动物细胞 （1）方??：显微注射法 （2）程序： ; 3、将目的基因导入微生物细胞 (1)原核生物特点： 繁殖快、单细胞、遗传物质少 (2)方法： ;四、目的基因的检测与鉴定;（一）检测 ;归纳步骤;DNA分子杂交示意图 ;（二）、鉴定（个体生物学水平）;四、目的基因的检测与鉴定;归纳: 基因工程的基本操作程序;练习1：为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。 （1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的 处，DNA连接酶作用于 处。（填“a”或“b”）;练习1：为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。 （2）将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和 法。 （3）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用 技术，该技术的核心是 和 。 （4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的 作探针进行分子杂交检测，又要用 方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。;1）以下说法正确的是 （ ） A、所有的限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B、质粒是基因工程中唯一的运载体 C、运载体必须具备的条件之一是：具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 D、基因控制的性状都能在后代表现出来;2）有关基因工程的叙述中，错误的是（ ） A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B、 限制性内切酶用于目的基因的获得 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、 人工合成目的基因不用限制性内切酶;3）有关基因工程的叙述正确的是 （ ） A、限制酶只在获得目的基因时才用 B、重组质粒的形成在细胞内完成 C、质粒都可作为运载体 D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料;4）基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是 （ ） A、人工合成目的基因 B、目的基因与运载体结合 C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达;;①不能转录为信使RNA，不能 编码蛋白质。;;真核细胞的 基因结构;