水中细菌学测定.pptVIP

水中的细菌学测定 一、水样的采集 1. 采水容器 2. 采样步骤及注意事项 二、样品保存 采好的水样，应迅速运往实验室，进行细菌学检验。一般从取样到检验不宜超过2h，否则应使用10℃以下的冷藏设备保存样品，但不得超过6h。 （四）菌落计数 二、 水中总大肠菌群的测定 总大肠菌群:指能在37℃ 48h之内发酵乳糖产酸产气的、需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性的无芽孢杆菌。 主要包括有埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、肠杆菌属、克雷伯氏菌属等菌属的细菌。 三、 耐热大肠菌群测定 四、 大肠埃希氏菌测定 × ×卫生细菌学检验 * GB/T5749-2006 《中华人民共和国国家标准 生活饮用水标准检验方法》（ 2007年7月1日执行）规定生活饮用水中微生物指标及限制为: 细菌总数（CFU/mL）不得超过100个； 总大肠菌群（ MPN/100mL 或CFU/100mL）不得检出； 耐热大肠菌群（ MPN/100mL 或CFU/100mL）不得检出； 大肠埃希氏菌（ MPN/100mL 或CFU/100mL）不得检出。 注：MPN表示最可能数；CFU表示菌落形成单位。当水样检出总大肠菌群时，应进一步检验大肠埃希氏菌或耐热大肠菌群；水样未检出总大肠菌群，不必检验大肠埃希氏菌或耐热大肠菌群。 ② 采样瓶的洗涤 ③ 采样瓶的灭菌: 160～170℃干热灭菌2h，或用高压蒸汽灭菌器，121℃灭菌15min ① 采样瓶：具磨口玻塞的500mL广口瓶 (1)去氯和高浓度重金属：灭菌前按500mL采样瓶加入0.3mL10%Na2S2O3溶液 (2) 采集江、河、湖、库等地表水样时，可握住瓶子下部直接将已灭菌的带塞采样瓶插入水中，约距水面10～15cm处采集 （3）采集一定深度的水样时，可使用单层采水器或深层采水器 （4）从自来水龙头采集样品时，采水前可先将水龙头打开至最大，放水3～5min，用酒精灯火焰灼烧约3min灭菌 （5）在同一采样点进行分层采样时，应自上而下进行，以免不同层次的搅扰；同一采样点与理化监测项目同时采样时，应先采集细菌学检验样品 （6）采样完毕，做好记录 三、 细菌总数的测定 细菌总数：指lmL水样在营养琼脂培养基中，于37℃培养24h后，所生长细菌菌落的总数。 （一）细菌总数测定的意义 ?可以反映水体有机污染的程度 ?生活饮用水的细菌总数lmL不得超过100个 （二）物品准备及培养基的制作 （三）测定步骤 稀释度选择及菌落总数报告方式 16 000或1.6×104 38 000或3.8×104 27 000或2.7×104 510 000或5.1×105 270或2.7×102 31 000或3.1×104 16 400 37 750 27 100 513 000 270 30 500 － 1.6 2.2 － － － 20 46 60 513 5 12 164 295 271 1 650 11 305 1 365 2 760 2 890 无法计算 27 无法计算 1 2 3 4 5 6 10-3 10-2 10-1 报告方式/ CFU·mL-1 菌落总数/CFU·mL-1 两个稀释度 菌落数之比 不同稀释度的平均菌落数 例次 两位以后的数字采取四舍六入五单双的原则取舍。 （五）计算和报告计数结果 细菌总数是以每个平皿菌落的总数或平均数(例如同一稀释度两个重复平皿的平均数)乘以稀释倍数而得来的。各种不同情况的计算方法如下： ①首先选择平均菌落数在30～300之间者进行计算，当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，即以该平均菌落数乘其稀释倍数报告(见例1)。 ②若有两个稀释度，其平均菌落数均在30～300之间，则应按二者之比值来决定。若其比值小于2应报告两者的平均数，若大于2则报告其中较小的数值(见例2、例3)。 ③若所有的稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释倍数最大的平均菌落数乘以稀释倍数报告(见例4)。 ④若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释倍数最小的平均菌落数乘以稀释倍数报告(见例5)。 ⑤若所有稀释度的平均菌落数均不在30～300之间，则以最接近300或30的平均菌落数乘稀释倍数报告（例6)。 ⑥ 菌落计数的报告：菌落数在100以内时按实有数报告；大于100时，采用二位有效数字，用10的指数来表示。在报告菌落数为“无法计数”时，应注明水样的稀释度。 （一）测定意义 作为水体受粪便污染的指标。 生活饮用水的总大肠菌群数每100升不得检出 伊红美兰特殊培养基上能够长出具有典型特征的菌落 检 样 稀 释 乳糖胆盐发酵管(36±1)℃，(24±2)h 不产气 总大肠菌群阴性 产 气 报 告 伊红美蓝琼脂平板（36±