第八节 RNA生物合成.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * 合成出的RNA与DNA形成杂交分子,约12bp，因结合不紧很易脱离。 （三）终止 合成移到终止信号时,酶不滑动,聚合停止,转录完成。 [特点]??参与的终止：?与RNA产物中富含C的部位结合,并诱使RNA聚合酶构象改变停止滑动; ?因子的解螺旋酶活性,利于RNA产物的释放。 ?其它终止方式：GC区形成发卡结构，聚U区使配对不稳定, RNA产物的释放。 （四）真核生物转录特点 ?启动子复杂,某些基因不含TATA box。 顺式作用元件[cis-acting-element]:指影响自身基因表达活性的DNA序列。 ?形成转录起始复合物，需多种蛋白因子参与。 转录因子[transcription factor]与反式作用因子[trans-acting factor]: 调节基因表达的蛋白为转录因子；它们与特异的顺式作用元件相互作用,并激活另一基因的转录。 起始前复合物的形成 [pre-initiation complex,PIC] ?转录终止序列，在3’端之后有共同序列AATAAA及多个GT序列，RNA在转录终止序列处被切断。 第二节 真核生物转录后的加工 意义：转录生成的前体RNA,无生物学活性,需加工变为成熟、有活性的RNA。 [加工种类]： ?剪切与剪接（cleavage,splicing） ?末端添加核苷酸（terminal additing） ?修饰（modification）：在碱基和核糖上进行化学修饰。 ? RNA编辑（ RNA editing） 一、mRNA前体的加工 （一）生成特点：[原核] ： mRNA是多顺反子(polycistronic],每分子RNA中含几种蛋白质信息，RNA寿命短，转录没完时翻译即开始。 例:乳糖操纵子，含Z,Y,A三个基因,分别编码半乳糖苷酶、透过酶及乙酰基转移酶。 [真核]：单顺反子[monocistronic],一个mRNA仅编码一种蛋白质。 外显子[exon]---在真核生物基因中编码蛋白质的序列。 内含子[intron]---非编码蛋白的序列,因其插于外显子之间又称插入序列,居间序列。 hnRNA[hetorogenous RNA]-----为mRNA的前体,转录物中外显子与内含子间隔排列，需经剪接加工后生成mRNA。 （二） mRNA前体加工过程 原核：多顺反子mRNA 真核：单独的顺反子 。 1. 5’末端帽子的生成：部位:核内 2. 3’末端多聚尾的生成：部位:核内 ,胞质有酶也可进行。 3 . 剪接作用:部位---胞核 在细胞核内, hnRNA剪切内含子,将个外显子连接为成熟mRNA的过程。少数基因不需剪接~?干扰素 例1：卵清蛋白基因成熟过程 。 例2:同一转录本, 在不同的组织, 因剪接差异产生各自不同的mRNA。 4 .甲基化：甲基化发生在剪接之前,在非编码区分子含1~2个m6A。 5.RNA编辑（RNA editing） 某些mRNA的核苷酸序列,在生成转录产物后还需插入、删除或取代一些核苷酸残基,方能生成具有正确翻译功能的模板,遗传信息在mRNA水平上的改变过程，称为RNA编辑。 二、tRNA前体的加工 1、切除多余的核苷酸，RNase p切除5’端多余的核苷酸；Rnase D切除3’端多余的核苷酸. 2、剪切内含子：核酸内切酶切除内含子,连接酶进行连接。 3、修饰与3’末端加-CCA:甲基化,脱氨基,还原反应在核苷酸基转移酶催化下，加入CCA。 三、rRNA前体的加工 特点： rRNA拷贝多,原核5~107;真核:果蝇260;Hela细胞1100个拷贝。 过程： 1、剪切作用，需核酸酶。 2、甲基化修饰，在碱基上。 3、自我剪接。 [核酶与内含子的关系]： 1.目前发现的核酶数量较少，常见于rRNA的内含子. 2.内含子存在于各种RNA分子中，它们并不都具有 核酶的功能。 3.内含子分为三类： （1）内含子可自我剪接,不需任何蛋白质参与,分两 型---?需鸟苷参与。?形成套索形式剪接。 （2）内含子的剪接需要蛋白酶的参与，如tRNA。 （3）内含子的剪接需形成剪接体的形式，除各种蛋白因子外还需各种snRNP的参与。  * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * *  第八节 RNA的生物合成 transcription P280 一、 DNA指导下RNA的合成 （