肾脏缺血再灌注损伤大鼠血NGAL的水平及意义.pdfVIP

青海大学硕士学位论文 前言 第一章 前言 急性肾衰竭（acute renal failure, ARF ）指肾小球滤过率（glomerular filtration rate, GFR ）骤然降低导致体内血清肌酐（serum creatinine, Scr ）和血尿素氮（blood urea nitrogen, BUN ）等代谢产物蓄积，从而引发一系列相应症状和体征的一种临 床综合征，在临床上较为常见，其病因相对复杂，明确病因，对提高疗效有着 重要价值。目前，提倡将ARF更名为急性肾损伤（acute kidney injury, AKI ）， AKI 的定义为：病程在3个月以内，包括血、尿、组织学及影像学检查所见的肾 脏结构与功能的异常；诊断标准为：肾功能在48h 内急剧下降，表现为Scr升高， 绝对值26.4µmol/L ；或较基础值升高≥50 ％；或尿量减少[尿量0.5ml/ （kg.h ）， 时间超过6h][1] 。目前，BUN 、Scr等较为滞后的指标无法满足AKI 的早期诊断， 经研究发现了一些新的指标，包括中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白 （neutrophil gelatinase-associated lipocalin, NGAL ）、脂肪酸结合蛋白、肾损伤分 + + 子-1、IL-18、胱抑素C、Na -H 交换体-3、肝细胞生长因子等。 NGAL是在人中性粒细胞中发现的lipocalin家族的新成员，与中性粒细胞明 [2-4] 胶酶共价结合 。在人的肾脏、气管、肺、肝、胃和结肠等均呈低表达状态。 它由一条多肽链构成，含有197个氨基酸残基，分子量为25KD 。结构上包括N端 的310-螺旋、C端的α-螺旋以及中间的八段反平行式β-折叠构成的β-折叠桶结构 [5] 。研究表明，NGAL是在肾近端小管缺血性损伤时出现的反应物，可于损伤后 [6] 2h之内在尿液中检出 。但临床上AKI患者常出现少尿，尿液不易收集，因此检 测血液中的早期标志物更具有临床意义。 肾缺血或肾毒素可引发血管活性物质的释放，造成肾血管收缩，肾血液复 流减少，肾小球有效滤过压、kf 和滤过分数下降，GFR 下降，导致少尿甚至无 尿。当缺血后血液复流时，细胞损伤更加明显，此即缺血- 再灌注损伤 （ischemia-reperfusion injury, IRI ）。细胞内钙离子超载和氧自由基的大量生成是 引起肾脏再灌注损伤的两个主要因素。目前有原尿返漏学说和阻塞学说最终均 引起GFR 下降，导致少尿。 目前查阅相关文献，发现有关NGAL 在缺血再灌注（ischemia-reperfusion, IR ） 所致AKI 血中水平的研究较少，这是本实验的创新之处。本实验通过双侧肾动 第1 页 共31 页 青海大学硕士学位论文 前言 [7-9] 脉夹闭30 分钟，建立肾脏IR 所致大鼠AKI 动物模型 ，旨在探讨模型大鼠血 NGAL 的水平及意义，为AKI 患者的早期临床诊断提供一定的实验依据。 第2 页 共31 页 青海大学硕士学位论文 材料与方法 第二章 材料与方法 2.1 实验材料 2.1.1 动物 50只SD雄性大鼠，标准体重 （200g±20g ），普通型，由兰大医学院实验动 物中心提供。购买后大鼠自由进摄食饮水，所用饲料为全价颗粒鼠饲料；饲养 环境光线充足，温度适中，湿度适宜。运至西宁后适应性喂养1周，大鼠一般状 态良好，开始实验。 2.1.2 试剂 血NGAL 试剂盒及 Scr、BUN 试剂盒