2014届高考生物一轮复习基础自主加强课件选修一 第1讲 微生物的培养与应用.ppt

统计微生物数目的方法 1．显微镜直接计数法 (1)原理：利用特定细菌计数板或血球计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。 (2)方法：用计数板计数。 (3)缺点：不能区分死菌与活菌。 2．间接计数法(活菌计数法) (1)原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少个活菌。 (2)方法：稀释混合平板法、稀释涂布平板法。 (3)缺点：当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落。 (4)注意事项：a.设置重复组，增强实验的说服力与准确性。b.为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。 (5)计算公式：每克样品中的菌株数＝C/V×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。 【解析】　土壤中各类微生物不同，因此在分离土壤中不同的微生物时要采用不同的稀释度，同时还要有针对性地提供培养条件；显微镜直接计数法不能区分活菌与死菌，要测定土壤样品中的活菌数目通常采用稀释涂布平板法；提纯和分离严格厌氧型微生物时，一般不用稀释涂布平板法，因为在涂布平板时容易接触到空气；分离能分解尿素的细菌时，要用以尿素为唯一氮源的选择培养基。 【答案】　B 课时作业(三十八) 【解析】　平板划线法能对细菌分离纯化，但不能对细菌进行计数，稀释涂布平板法可以分离菌种还可进行计数，A错误。 【答案】　A 2．(2012·北京海淀期中)下列关于微生物培养的叙述，不正确的是 (　　) A．获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵 B．高温灭菌的目的是杀死微生物的细胞、孢子、芽孢 C．划线分离可在培养基上获得均匀分布的单菌落 D．稀释涂布平板法易获得单菌落和计数活菌数目 【解析】　获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵；高温灭菌的目的是杀死微生物的细胞、孢子、芽孢；稀释涂布平板法易获得单菌落和计数活菌数目；划线分离可在培养基上获得单菌落但不是均匀分布的。 【答案】　C 3．(2012·浙江自选)幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下： 配制培养基―→灭菌、倒平板―→X―→培养―→观察 请回答： (1)在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有①________，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现②________色环带。 (2)下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是③________灭菌。 A．高压蒸汽　　　　　　　 B．紫外灯照射 C．70%酒精浸泡 D．过滤 (3)步骤X表示④________。在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液⑤________到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得⑥________菌落。 (4)在培养时，需将培养皿倒置并放在⑦________中。若不倒置培养，将导致⑧________。 (5)临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将14C标记的⑨________分解为NH3和14CO2。 【解析】　此题考查微生物的分离与培养知识。(1)幽门螺杆菌(Hp)含有脲酶，能以尿素为氮源，在加入尿素和酚红指示剂的培养基中培养Hp，由于尿素经脲酶的降解可产生碱性的NH3，NH3能使培养基中的酚红由红黄色变成红色，故菌落周围会出现红色环带。(2)由于尿素加热会分解，对尿素溶液进行灭菌最好用G6玻璃砂漏斗过滤。(3)微生物的分离和培养步骤是：配制培养基→灭菌、倒平板→接种→培养。为获得单菌落，接种操作前应先将菌液稀释，然后将菌液涂布到培养基平面上即可。 (4)微生物培养时需将培养皿倒置并放在恒温培养箱中，若不倒置培养，则无法形成单菌落。(5)幽门螺杆菌能将14C标记的尿素分解为NH3和14CO2，故临床上常用14C呼气试验检测人体内幽门螺杆菌的存在。 【答案】　(1)脲酶　红　(2)D　(3)接种　涂布　单 (4)恒温培养箱　无法形成单菌落　(5)尿素 1.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 实验原理 (1)筛选菌株：提供有利于目的菌株生长的条件(如营养、温度、pH等)，同时抑制其他微生物的生长，常用选择培养基筛选。 (2)统计菌落数目 ①方法：稀释涂布平板法——统计活菌数(显微镜直接计数法不能排除死菌)。 (3)设置对照：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。 实验流程 土壤取样：从距地表约3～8 cm的土壤层取样 2. 分解纤维素的微生物的分离 实验原理 　　　　　　　纤维素酶(复合酶) 即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 实验流程 土壤取样：富含纤维素的环境 Ⅱ.下面是探究如何