胶质瘤侵袭性生长和基质金属.docVIP

胶质瘤侵袭性生长与基质金属蛋白酶-2及其抑制物关系的研究李 蕴 潜指导教师 索敬贤 教授 王长坤 教授吉林大学第一医院神经外科学前 言大量研究表明，尽管近年来胶质瘤的治疗技术不断提高，但并未从根本上显著改善患者总的预后，其中一个重要原因是胶质瘤的侵袭性生长给手术彻底切除带来许多困难。肿瘤侵袭生长是指瘤细胞突破基底膜和细胞外基质（ECM）构成的组织学屏障，侵犯到邻近的正常组织，并在该处继续生长、增殖的过程。基底膜和ECM降解是肿瘤侵袭的关键，能降解ECM的蛋白酶有多种。其中基质金属蛋白酶类（MMPs）是与肿瘤的侵袭生长关系十分密切的蛋白水解酶。体内MMPs的表达和活性有多种调节方式，包括转录水平调节、酶原的活化、特异性组织抑制因子的调节等。其中金属蛋白酶组织抑制物（TIMPs）是MMPs的特异性抑制物。已有研究证明，MMP-2和MMP-9是降解ECM成分的重要蛋白酶。在乳腺癌、食道癌、肺癌等多种癌组织均有这两种酶表达和活性增加；肿瘤的恶性程度与MMP-2、MMP-9表达水平呈正相关；MMP-2／TIMP-2的比值可决定肿瘤恶性程度及预后。这些研究均证明，肿瘤细胞的侵袭能力与MMP-2、MMP-9及TIMP-2的表达和活性有密切联系，其中与MMP-2和TIMP-2的关系更为重要。然而，与上述肿瘤的研究相比，胶质瘤的侵袭能力与MMPs和TIMPs之间关系的研究很少。有初步研究表明，MMP-2、MMP-9和MT-MMPs与胶质瘤侵袭性的关系更密切，可能是胶质瘤细胞侵袭能力的重要因素。但有关MMP-2和TIMP-2之间的平衡与胶质瘤侵袭性生长的关系尚未阐明，深入的研究很少。本研究利用临床材料和实验材料进行下述5个方面的研究：通过这些人体和实验材料的研究，目的是探讨胶质瘤侵袭性生长行为与MMP-2、TIMP-2表达以及活性的关系，为从抑制MMP活性的角度阻止胶质瘤的侵袭性提供科学依据。实验一胶质瘤基质金属蛋白酶-2及其抑制物-2蛋白表达的研究材料来源：收集1999年至2001年本院神经外科手术切除并经病理确诊的胶质瘤标本35例，男性15例，女性20例，平均年龄40.3岁（10~77岁）。患者术前未使用过抗癌药物。按Kernohan标准进行分级：Ⅰ级7例，Ⅱ级12例，Ⅲ级10例，Ⅳ级6例。另取2例正常脑组织作为对照。免疫组织化学染色方法和结果判定：用LSAB法进行人胶质瘤组织MMP-2、TIMP-2和Ki-67的免疫组化染色。△MMP-2和TIMP-2表达的判定以染色强度和阳性细胞的百分率之和（分值）进行评价。△Ki-67表达是在网格测试板进行计数，然后计算出Ki-67标记指数（LI）结 果一、MMP-2的表达MMP-2阳性染色位于瘤细胞的胞浆。表达MMP-2的阳性细胞多呈散在分布，但一些病例在肿瘤侵润的边缘常常相对集中。随着胶质瘤恶性程度的增加，MMP-2蛋白表达阳性的细胞数逐渐增多，染色强度逐渐增强，表达强度也逐渐增加（附图1~4），其中以Ⅳ级胶质瘤MMP-2蛋白表达最高。各组间的阳性表达率和表达强度比较均有显著性意义（表3）。（附图1~4） 表3 胶质瘤MMP-2阳性细胞表达率及表达强度（x±s）级 别 例 数 阳性表达（%） 表达强度（分值） Ⅰ 7 10.42±3.95 2.14±0.38 Ⅱ 12 29.92±7.69a 3.17±0.71 a Ⅲ 10 45.40±9.01ab 4.00±0.70 ab Ⅳ 6 57.17±11.39abc 5.83±0.41 abc a: 与Ⅰ级比较, p0.05; b: 与Ⅱ级比较，p0.05; c: 与Ⅲ级比较, p0.05二、TIMP-2的表达TIMP-2阳性染色位于瘤细胞的胞浆中。阳性细胞多呈散在性分布。TIMP-2免疫组化显示的情况与MMP-2相反，即随着胶质瘤恶性程度的增加，TIMP-2蛋白表达阳性的细胞数逐渐减少，表达强度也逐渐下降，以Ⅰ级胶质瘤TIMP-2蛋白表达最高，Ⅳ级表达最低（附图5~8）。同时，随着胶质瘤恶性程度的增加，MMP-2／TIMP-2的比值也明显升高，各组间比较有统计学意义（见表4）。（附图5~8）表4 胶质瘤TIMP-2阳性细胞表达率、表达强度及MMP-2/TIMP-2分值的比值（x±s）级 别 例 数 阳性表达（%） 表达强度（分值） MMP-2/TIMP-2 Ⅰ 7 51.81±12.28 5.57±0.53 0.37±