李慧 先天性脊柱裂和肛门直肠畸形脊髓蛋白质双向电泳图谱差异分析课件.pptVIP

先天性脊柱裂和肛门直肠畸形脊髓蛋白质双向电泳图谱差异分析 Differential Protein Profiles in 2-DE of Spinal Cord in Rat Fetus with Spina Bifida and Anorectal Malformation 前言 先天性脊柱裂、先天性肛门直肠畸形： 人群发生率分别为1‰-5‰、0.2‰-0.7‰ 前言 前言 蛋白质组学： 从组织细胞的整体蛋白质水平上揭示了生 命活动的基本规律 前言 前言 本研究将采用双向电泳技术，研究两种畸形动物模型在胚胎发育阶段的脊髓组织蛋白质组的表达情况和变化规律，在蛋白质水平探讨两种畸形之间的共同发生规律，为畸形的胚胎早期诊断和治疗提供基础资料。 实验方法 结果 脊柱裂和肛门直肠畸形模型大鼠制作结果 RA组： 每只孕鼠平均产仔数为8.7只 对照组：每只孕鼠平均产仔数为10只 结果 对照组和RA组差异蛋白表达情况分析 给药无畸形组 ARM组 ARM+SB组 匹配点 542 406 348 上调5倍以上 26 16 13 下调5倍以上 19 14 2 RA组内差异蛋白表达情况分析 ARM组 ARM+SB组 上调5倍以上 22 12 下调5倍以上 14 6 结果 ARM组和ARM+SB组差异蛋白表达情况分析 ARM组上调5倍以上 仅表达于ARM组 87 84 ARM组下调5倍以上 仅表达于ARM+SB组 77 70 结论 本研究将2-D 电泳用于脊髓组织的蛋白质组分析，着重研究了脊柱裂和肛门直肠畸形之间有无共性差异表达的蛋白质点 结果可见各组蛋白点总体分布重复性较好，主要点阵分布形态基本相同，某些局部点有明显的增多、减少或增强、减弱的改变 肛门直肠畸形组和肛门直肠畸形合并脊柱裂组共存在164个差异点，部分蛋白点仅在畸形组表达上调或下调，而在对照组和给药正常组之间无明显变化 * 卫生部小儿先天畸形重点实验室 The key laboratory of health ministry for congenital malformation * 李　慧 李文豪 康丽娜 袁正伟 中国医科大学盛京医院 卫生部小儿先天畸形重点实验室 遗传因素 环境因素 多基因遗传病 治疗、预防困难 发病机制不清 病理改变复杂 神经病理学研究 动物模型 相关基因 叶酸研究 先天性脊柱裂、先天性肛门直肠 畸形的发生可能都是与胚胎期脊 髓神经发育异常有关。 Protein prefractionation Protein prefractionation Sample prep 1-D or 2-D LC 2-D electrophoresis/DIGE ESI MS/MS MALDI MS/MS Data analysis 对照组 给药无畸形组 ARM组 ARM+SB组 样品制备 动物模型制作 IEF电泳 平衡 SDS电泳 图像扫描 数据分析 +SB RA exposure 11 28 29 19 20 127 dead ARM ARM Normal with control Total 4 pI 7 24cm PH4-7 胶条，90微克胎鼠脊髓蛋白 Match ID Control group Normal with RA exposure ARM ARM+SB 265 0.2025 0.1919 0.4011 0.5377 325 0.0729 0.1139 0.2200 0.2385 455 0.0335 0.0309 0.1227 0.1052 413 0.5965 0.5604 0.1935 0.1464 441 2.9179 2.7223 1.2740 1.6475 431 0.8516 0.77