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仪器分析实验指导 （加工、酿酒） 河北科技师范学院 实验注意事项 实验课是提高教学质量的重要环节，通过实验巩固理论知识，培养独立工作能力，为了保证实验顺利进行，实验前应注意以下几点： 1 每次实验前必须详细预习实验讲义，明确实验目的、原理方法及实验步骤，并在记录本上拟出简单的实验原理、使用方法及操作时的注意事项。 2 实验时应严格按照实验步骤及试剂用量进行操作，不能任意变更。不熟悉的仪器设备，应先请教老师后再使用。切勿随意乱动。 3 实验时如有问题发生，应首先用自己学过的知识，独立思考加以解决，努力培养独立分析问题、解决问题的能力。如自己不能解决，可与指导老师共同讨论研究，提出解决问题的方法。 4 实验进行时，必须把随时观察到的现象和实验数据如实地记录在记录本上，不得记在其他纸上，要养成良好的作原始记录的习惯。 5 实验中所有的玻璃仪器及其他器皿，应洗涤干净。桌面、地面要保持清洁。实验完毕后，所有仪器设备应恢复原状。 6 必须遵守实验室的规则： 未经老师允许，不得碰触任何药品、电源、仪器设备。 室内不得高声谈笑，必须保持安静的实验环境。 爱护仪器，不浪费药品、节省水电。遵守实验室的安全措施。 公用仪器及试剂瓶，不要移动原有位置。注意瓶塞切勿盖错，以免污染试剂。用毕后立即放回原处。对于有害药品应按实验室规定取用。 滤纸、火柴棒、碎玻璃等投入废品缸，切勿丢入水池，以保证下水道畅通。 所用仪器如有损坏，应自行登记并向指导老师报告。 保持实验室的整齐清洁，个人所带与实验无关的东西，如书包等物要放在指定地方，不得乱放在实验桌上。 最后一组实验人员，离开实验室时，应检查水电、门、窗等是否关闭，以保证实验室的安全。 实验一 纸色谱法分离植物色素 实验地点：发酵工程生物技术实验室 一、实验目的 1、叶绿体中色素提取和分离的方法。 2、。 二、实验原理： 1、叶绿体中的色素能溶解在酒精（有机溶剂丙酮、汽油、苯、石油醚等）中，所以用丙酮可提取叶绿体中色素。 2、色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快，溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得慢，因而可用层析液将不同的色素分离。 三、实验材料： 新鲜的绿叶（如菠菜的绿叶）无水乙醇层析液二氧化硅和碳酸钙。干燥的定性滤纸，试管，棉塞，试管架，研钵，玻璃漏斗，毛细吸管，剪刀，药勺，量筒（10ml），天平。 、方法步骤： 提取色素: （1）称取5g绿色叶片并剪碎 （2）加入少量SiO2、CaCO3和5ml研钵→研磨→漏斗过滤→收集到试管内并塞紧管口制滤纸条:（1）将干燥的滤纸剪成6cm长，1cm宽的纸条，剪去一端两角（使层析液同时到达滤液细线） （2）在距剪角一端1cm处用铅笔画线 滤液划线:（1）用毛细管吸少量的滤液沿铅笔线处小心均匀地划一条滤液细线（2）干燥后重复划纸上层析（1）向烧杯中倒入3ml层析液（以层析液不没及滤液细线为准） （2）将滤纸条尖端朝下略微斜靠烧杯内壁，轻轻插入层析液中 （3）用培养皿盖盖上烧杯观察结果：滤纸条上出现四条宽度、颜色不同的彩带（如下图） 最宽：叶绿素a； 最窄：叶绿素b； 相邻色素带最近：叶绿素a和叶绿素b； 相邻色素带最远：胡萝卜素和叶黄素。 、： 1、二氧化硅：为了使研磨充分；碳酸钙：保护色素免受破坏；丙酮：色素的溶剂。 2、扩散最快的是胡萝卜素（橙黄色），扩散最慢的是叶绿素b（黄绿色）。 3、滤纸上有四条色素带说明了绿叶中的色素有四种，它们在层析液中的溶解度不同，随层析液在滤纸上扩散的快慢也不一样。 4、裁取定性滤纸时，注意双手尽量不要接触纸面，以免手上的油脂或其他脏物污染滤纸。 5、制备滤纸条时，要将滤纸条的一端剪去两角这样可以使色素在滤纸条上扩散均匀便于观察实验结果。 6、根据烧杯的高度制备滤纸条，让滤纸条长度高出烧杯1cm ，高出的部分做直角弯折。 7、滤纸上的滤液细线如果触到层析液，细线上的色素就会溶解到层析液中，就不会在滤纸上扩散开来，实验就会失败。 8、画滤液细线时，用力要均匀，速度要适中9、研磨要迅速、充分。因为容易挥发为了使叶绿体完全破裂从而能提取较多的色素叶绿素极不稳定，能被活细胞中的叶绿素酶水解而被破坏。 。微量注射器微量注射器是易碎器械，而且常用的一般是容积为1μ的注射器，使用时应多加小心，不用时要洗净放入内，不要随便玩弄，来回空抽，否则会严重磨损，损坏气密性，降低准确度。 用微量注射器取液体试样，如内有气泡则将针头朝上，使气泡上升至完全排出，再将过量的试样排出，用纸吸去针尖外所试样。注意切勿使针头内的试样流失。取好样后应立即进样，整个动作应进行得稳当，连贯，迅速。针尖在进样器中的位置，插入速度，停留时间和拔出速度等都会影响进样的重复性。微量注射器在使用前后都须用丙酮或丁酮等溶剂清洗，而且不同种类试剂