香蕉枯萎病菌β-葡萄糖苷酶基因分子标记的构建及gfp基因转化子的生物.docVIP

香蕉枯萎病菌β-葡萄糖苷酶基因分子标记的构建及gfp基因转化子的生物学特性研究 第一章 绪 论 1.1 香蕉枯萎病研究综述 1.1.1 香蕉的营养保健价值 1.1.2 香蕉种植的经济价值 1.1.3 香蕉枯萎病的病原菌、生理小种及症状 1.1.4 香蕉枯萎病传播方式与发病特点 1.1.5 香蕉枯萎病菌鉴定研究进展 1.1.6 香蕉枯萎病防治方法 1.2 丝状真菌的转化 1.2.1 研究概况 1.2.2 选择标记和转化载体 1.2.3 真菌DNA转化方法 1.2.4 转化DNA在受体中的命运 1.3 绿色荧光蛋白(GFP)在真菌研究中的应用 1.4 香蕉枯萎病菌致病相关物质β-D-葡萄糖苷酶基因 1.4.1 香蕉枯萎病菌分子病理研究进展 1.4.2 香蕉枯萎病菌致病相关物质β-葡萄糖苷酶的研究进展 1.4.3 分子标记的研究进展 1.5 本研究的目的和意义 第二章 香蕉植株中镰刀菌的分离与鉴定 1 材料 2 方法 3 结果与分析 3.1 香蕉枯萎病菌的分离 3.1.1香蕉枯萎病的症状 3.1.2 真菌的分离 3.1.3 真菌的纯化与保存 3.2 香蕉枯萎病菌的鉴定 3.2.1 尖孢镰刀菌形态鉴定 3.2.2 分子鉴定 3.2.2.1镰刀菌特异性引物PCR鉴定 3.2.2.2尖孢镰刀菌特异性引物PCR鉴定 4讨论 第三章 香蕉枯萎病菌的β-葡萄糖苷酶基因分子标记的构建 1 材料 2 方法 3 结果与分析 3.1 DNA与RNA质量分析 3.2 兼并引物扩增部分 3.3 3/RACE扩增结果 3.4 5/RACE扩增结果 3.5 全长片段的获得与分析 3.6 序列同源性分析 3.7 β-葡萄糖苷酶基因的多样性分析 4 讨论 第四章 香蕉枯萎病菌转gfp基因研究 1 材料 2 方法 3 结果与分析 3.1 香蕉枯萎病菌原生质体形成 3.1.1 原生质体FOC-3076对潮霉素B（HmB）的敏感性测定 3.3.2 转化子的潮霉素B（HmB）敏感性测定PCR检测验证 3.5 转化子荧光检测 3.5.1 FOC-3076菌株转化子的荧光稳定性分析GFP遗传转化体系的建立与优化 4.2 绿色荧光蛋白基因转化香蕉枯萎病菌 第五章 gfp基因标记香蕉枯萎病菌后的生物学特性 1 材料 2 方法 3 结果与分析 3.1 转GFP尖孢镰刀菌的形态特征 3.1.1 转化子的菌落形态 3.2 gfp标记香蕉枯萎病菌FOC-3076的生物学特性 3.2.1 转化子的生长速度测定 3.2.2 pH值对转化子生长的影响 3.3 转GFP尖孢镰刀菌的侵染特性 3.3.1 转化子对香蕉横切面侵染特性 3.3.2 转化子对香蕉纵切面侵染特性 3.3.3 转化子对香蕉植株侵染速度 3.3.4 植株中分离出的转化子荧光稳定性测定 3.4 转化子对香蕉植株致病性测定 4 讨论 第六章 小结与展望 参考文献 附录 个人简历 致谢