河南土源性线虫病监测手册.docVIP

河南省土源性线虫病监测手册 第一章 病原学监测 一、监测对象 各监测点年龄在3周岁以上的常住人口和外来人口居住满一年以上者，外出6个月以上者除外。 二、监测时间 每年9-11月份进行。 三、检查方法 1．采用改良加藤厚涂片法（Kato-Katz）进行病原学检查（1粪3检）。 2．3～12周岁儿童加做透明胶纸肛拭法检测蛲虫卵。 （一）、改良加藤法（Kato-Katz）操作步骤 1．材料的准备 1.1 塑料定量模板(统一供应)：规格为30mm×40mm×1mm的聚苯乙烯模板，中央孔为圆台形，其短径3mm，长径4mm，高1mm，容积为38.75mm3； 1.2 软性塑料刮片(统一供应)：两头刮片型； 1.3 尼龙绢片(统一供应):规格为80～100目,裁剪成8cm×8cm； 1.4 透明液的配制：取100ml蒸馏水、100ml纯甘油、3%的孔雀绿（或亚甲蓝）1ml，按此比例混合； 1.5 亲水性透明玻璃纸(统一供应)：规格为30mm×25mm、厚40μm，使用前需在透明液中浸泡24小时以上，使玻璃纸显示绿色或蓝色； 1.6 载玻片：规格为75 mm×25.5mm、厚1.0mm～1.2mm； 1.7 其它：原始登记表、镊子、剪刀、记号笔、标本盒、吸水纸、光学显微镜和一次性手套等。 2．操作步骤 2.1 编号：每份粪样取3张载玻片进行编号（与待检粪样的编号相同）； 2.2 打开待检粪样的包装，将尼龙绢片置于待检粪样上，用塑料刮片轻压尼龙绢片并在其上轻刮，使细粪渣透过尼龙绢片的微孔滤出至绢片表面； 2.3 将定量板放在载玻片中部，然后用刮片将绢片表面的细粪渣填入定量板的中央孔内，使填满全孔并抹平； 2.4 小心移去定量板，使粪样留在载玻片上； 2.5 取一张浸泡好的亲水玻璃纸，抖掉多余的浸泡液，盖在粪样上，用橡皮塞或另一块较厚的载玻片覆于玻璃纸上垂直均匀用力压制，使粪便均匀地展开至玻璃纸边缘； 2.6 待粪便透明后及时镜检。 3．结果观察 3.1将透明后的加藤片置于光学显微镜的载物台上在低倍（10×）镜下进行镜检，镜检时仔细检查每一视野，并特别注意受精蛔虫卵与未受精蛔虫卵的鉴别。 3.2 Kato-Katz厚涂片虫卵计数方法。 每张涂片发现的蛔虫卵、鞭虫卵、钩虫卵、其他吸虫卵都要计数。镜检所用显微镜统一目镜为10×的镜头。由于一些地区蛔虫感染度特别高，有时一张涂片虫卵数达数千甚至数万个，计数蛔虫卵比较费时，为此对Kato-Katz厚涂片蛔虫卵计数作以下规定：每张涂片首先随意粗查几个视野，若每个视野蛔虫卵数在10个以上，可以暂不计数蛔虫卵。先读完全片的各视野钩虫卵数和鞭虫卵数，再用定视野抽查法推算全片蛔虫卵数。具体步骤是： 3.2.1按图1分布固定抽查10个视野，并算出抽查的10个视野蛔虫卵或华支睾吸虫卵总数； 图1. 10个视野分布 3.2.2计算出该涂片粪膜视野数，再推算出全片蛔虫卵数。 按一定的规律，如自左而右，自上而下，再自右而左，一行接一行，一个视野接一个视野地用推行器移动涂片，数出全片粪膜视野数，则：全片粪膜蛔虫卵总数＝抽查的10个视野蛔虫卵数之和×全片粪膜视野÷10 例如：抽查的10个视野蛔虫卵数相加为366，全片粪膜视野数为78，则： 全片粪膜蛔虫卵总数＝366×78÷10＝2854.8＝2855 3.3 结果登记 观察结果即时记录在原始登记表，并及时转登表1。 4．注意事项 4.1亲水性透明玻璃纸：使用前需全部浸入透明液中，浸泡24小时以上。 4.2把刮片上的细粪渣填入定量板时，必须填满中央孔全孔并抹平；压制涂片时尽量使粪便均匀展开至玻璃纸边缘，但应避免粪渣溢出； 4.3涂片放置时间长短是关键。一般室温25℃、75%湿度下，涂片放置不宜超过2小时。若温度低，空气湿度大，涂片放置时间可适当延长。总之，涂片放置时间取决于粪样透明度，只要透明了，就应及时镜检，否则透明过渡，薄壳虫卵易变形看不清楚，会造成漏检或误判。 4.4 用椭圆孔塑料定量板，每孔所容粪便重量平均41.7mg，每片所得虫卵数乘以24即得每克粪便的虫卵数，但每片虫卵数不必乘24，填在表1为实际数的虫卵数（不乘24）。 4.5 粪样一送三检，三片全计数取平均值。 （二）透明胶纸肛拭法操作步骤 1．材料 牛皮纸（或聚乙烯塑料薄膜）、市售透明粘性胶带纸（宽约2.6cm）、载玻片、小纸袋。 2．步骤 1）将牛皮纸（或聚乙烯塑料薄膜）剪成长10cm，宽8cm，在中央剪一个直径24mm圆形孔。（略大于1元钱硬币）。 2）用透明胶带纸补贴圆形孔。 3）再把载玻片盖在胶带纸上（保护胶面），装入纸袋中，纸袋外面写上受检者姓名、年龄、性别和编号。 4）检查时，取下载玻片，将有胶的一面在肛周粘压后，覆回载玻片装入纸袋，带回实验室镜检