乳腺癌HER2蛋白阳性表达基因状态及其与P53蛋白相关性研究.docVIP

乳腺癌HER2蛋白阳性表达基因状态及其与P53蛋白相关性研究 　　[摘要]目的 研究乳腺癌HER2蛋白表达阳性的基因状态及其与P53蛋白相关性，探讨其与乳腺癌发生、发展的内在关系。方法 选取257例HER2蛋白表达阳性的浸润性乳腺癌样本，分别应用荧光原位杂交（FISH）法和免疫组织化学EliVisionTMplus法对标本中的HER2基因和P53蛋白、ER和PR受体进行检测并做相关性分析。 结果 ①HER2基因扩增率64.59%（166/257）；其中IHC（2+）56.48%（109/193），（3+）89.06%（57/64）；HER2基因扩增和其蛋白阳性表达比较有显著相关性（P 0.05）。 结论 HER2基因扩增率与P53蛋白表达率呈正相关，两者指标的联合检测对乳腺癌的转移、预后评估具有重要的参考意义。 　　[关键词] 乳腺肿瘤；HER2；P53蛋白；免疫组织化学；荧光原位杂交 　　[中图分类号] R737.9 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2013）33-0113-03 　　随着科研的发展，分子生物学指标作为癌症发展、治疗及预后评估的价值取得了长足发展，受到越来越多的国内外学者高度重视。HER2基因位于人17号染色体长臂21位，编码一种与人表皮生长因子受体高度同源的酪氨酸激酶受体，在乳腺癌的侵袭、治疗、预后评估中起着重要作用。选取我院257例HER2蛋白表达阳性的浸润性乳腺癌手术切除标本，采用荧光原位杂交（FISH）法检测标本中的HER2基因扩增状态，探讨其与P53蛋白表达及临床预后因素的关系。 　　1资料与方法 　　1.1病例资料 　　收集我院病理科2010年10月～2013年6月外检手术切除浸润性乳腺癌根治病例，筛选出257例HER2蛋白阳性表达标本，其中HER2蛋白（2+）193例，（3+）64例，患者均为女性，年龄26～79岁，平均51岁。病理类型包括浸润性导管癌224例，伴髓样特征的浸润性癌15例，浸润性微乳头状癌10例，大汗腺癌8例。 　　1.2 免疫组织化学检测（IHC） 　　采用EliVisionTMplus法染色，所用HER2蛋白、雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）和P53蛋白抗体试剂盒均采购自福建迈新公司。手术切除标本均10%中性福尔马林固定，经脱水石蜡包埋，4μm连续切片，于65℃烤箱烤片2h，脱蜡、水化，柠檬酸盐高压修复，按照试剂盒操作说明书步骤严格执行。实验以预知阳性标本作为阳性对照，PBS替代一抗为阴性对照。结果判定：HER2判读标准 0：全部癌细胞中细胞膜无着色者；1+：任何比例癌细胞呈现微弱或不完整的细胞膜着色者；2+：10%癌细胞呈现轻-中度、完整但不均匀的细胞膜着色或2.2或众多橘红色信号成簇分布者归入阳性，视为基因扩增；比值1.8～2.2 者，扩大癌细胞计数到100个或重新检测。 　　1.4 统计学方法 　　采用SPSS13.0统计软件分析。采用非参数检验判断HER2基因扩增与蛋白表达状况及与年龄、肿瘤大小、病理学类型、淋巴结转移和ER、PR表达的相互关系；以P 0.05）。HER2基因扩增和P53蛋白表达与患者腋窝淋巴结转移、ER和PR受体表达差异有显著性（P 　　本研究结果显示，HER2结果IHC2+中FISH阳性率56.48%，与国外学者的研究数据有差异[4，5]。HER2结果IHC3+中FISH阳性率89.06%，与国外学者研究数据相近。多数情况下，HER2蛋白过表达与DNA扩增同时发生，但由于肿瘤细胞17号染色体多体[6]或因IHC蛋白检测过程容易受到多种外在环节影响等原因，常出现HER2蛋白过表达与FISH检测结果不一致的情况，因此我们建议，HER2蛋白阳性病人均应进行FISH检测，明确基因状态。本研究中HER2蛋白2+的FISH阳性率偏高于国外学者数据，可能与样本量小、地域人群差异或对切片判读标准把握不同有关。 　　P53基因分为野生型和突变型。编码正常的P53基因（野生型）是与人类肿瘤的发生、发展高度相关的抑癌基因，正常组织中一般不表达。突变型P53基因失去野生型P53基因的生物活性，不能修复细胞受损DNA，导致细胞发生癌变[7]，应用IHC方法只能检测突变型P53蛋白表达。本研究结果表明，在ER、PR受体阴性组及发生腋窝淋巴结转移组中，HER2基因扩增与P53蛋白表达明显高于ER、PR受体阳性组及腋窝淋巴结无转移组（P 0.05）。本研究结果中，同时具有HER2基因扩增和P53蛋白表达者，更多发生高阴性激素受体状态和淋巴结转移情况，揭示患者预后不良。乳腺癌的发生、进展机制不明，其过程可能是多种癌基因、抑癌基因相互作用、影响的结果，而两者在其中是否起到某种共同参与协同作用有待更深入研究。 　　综上所