第10篇 吸光光度法.pptVIP

第10章 吸光光度法 10.1 物质对光的选择性吸收 和光吸收的基本定律 10.2 分光光度计及吸收光谱 10.3 显色反应及影响因素 10.4 吸光光度分析及误差控制 10.5 其它吸光光度法 10.6 吸光光度法的应用 吸光光度法 10.1 物质对光的选择性吸收和光吸收的基本定律 2.吸收光谱产生的原因 3.物质对光的选择性吸收 10.1.2 光吸收定律－朗伯-比尔定律 灵敏度表示方法 (1) 摩尔吸光系数 e 摩尔吸光系数ε的讨论 2. 单色器 3.吸收池 4. 检测系统 最大吸收波长 lmax= 525nm。 吸收曲线是一种特征曲线 在最大吸收波长附近，吸光度测量的灵敏度最高 参比液的选择 要求： a. 选择性好 b. 灵敏度高 (ε104) c. 产物的化学组成稳定 d. 化学性质稳定 e. 反应和产物有明显的颜色差别 (?l60nm) 控制吸光度范围的方法 1.改变比色皿的厚度 2.改变试液的浓度(称样量、稀释倍数等) 3.示差法 例1:Fe(phen)32+溶液的 e =1.1×104L·mol-1 ·cm-1, 在lmax处,用2cm比色皿测得溶液吸光度A=2. 若DT=0.5%, 1)求Dc/c. 2)怎样才能使A=0.2~0.7? 例2.若上题中比色皿厚度为0.5cm,欲使测量误差最小,溶液的浓度应为多少? ①简便，不需要仪器，也适于大批试样分析；②灵敏度较高，因为液层厚度大，所以适于微量组分测定；③适用范围广，因为可在复合光下进行，有些显色反应不符合Lambert－Beer‘s Law的也可测定。（4）缺点：① 色阶难配； ② 准确度较差，相对误差5%～20%。 (2)示差吸光光度法的误差 因为在示差法中，△A∝△C，所以仪器测量所造成的浓度误差应为△C的百分之几，而△C仅是绝对浓度的很小部分，所以使绝对浓度的测量准确度大大提高。 例： 即：△C仅占CX的1/10。 若在适宜范围内读数，其误差为5%，则绝对浓度造成的测量相对误差仅0.5%。 示差法之所以能提高测定结果的准确度，实质上是充分地利用了仪器的灵敏度，扩大了读数标尺的结果。 例题 示差法提高准确度的实质 3、混合组分分析（1）x、y二组分互不干扰（最简单）（2）x与y的吸收峰部分重叠仍可按单一组分测定y( )， 但在处 ，y干扰x测定。对x： ①对y： ② 对x+y： ③ 解方程组： （3）x、y相互干扰（设b=1.0）在 处： ①在 处：  ②?解此方程组得：注：上述讨论中 由纯物质测得。 1 了解分子对光的吸收与溶液颜色的关系. 吸收曲线—定性分析的基础。 掌握定量分析的基础—朗伯-比尔定律：A=?bc=-lgT 式中各参数的物理意义，定量计算。 2 了解分光光度法的特点，分光光度计的基本部件。 3 掌握灵敏度的表示—摩尔吸光系数的意义和计算； 准确度—适宜的测量范围、偏离比尔定律的原因。 4 显色反应及条件的确定: 显色剂用量、酸度、时间、温度。 5 应用: 单一组分测定：吸光系数法、校正曲线法、对照法，酸碱离解常数的测定。多组分的测定，等吸收双波长消去法，系数倍率法。 　标准曲线法测单一组分 　　1.选择合适的显色反应和显色条件 　　2.绘出被测组分的 吸收光谱曲线(用标液) 　　3.在λmax下测一系列标准溶液的A值，绘制工作曲线A---c 　　4.与工作曲线相同的方法，测未知物AX ， 从工作曲线上查cX 6.8 吸光光度法的应用 1、 测定弱酸和弱碱的离解常数 AHB和AB-分别为有机弱酸HB在强酸和强碱性时的吸光度，它们此时分别全部以[HB]或[B-]形式存在。 HB ＝H+ + B- [H+][B-] Ka = [HB] pKa=pH+ lg [HB