生物大分子和疾病.docxVIP

siRNA的特点1 长度约在22nt左右2依赖Dicer的加工，是Dicer的产物，所以具有Dicer的产物的特点3、生成需要Argonaute家族蛋白存在。4、是RISC组分5、siRNA合成是由双链的RNA形成的。6、siRNA一般是人工体外合成的，通过转染进入人体内，是RNA干涉的中间产物7、结构上，siRNA是双链RNA8、在Dicer酶的加工过程中，siRNA对称地来源于双链RNA的前体的两侧臂。9、在作用位置上，siRNA可作用于mRNA的任何部位，并与mRNA完全互补。10、在作用方式上，siRNA自能导致靶标基因的降解，即为转录水平后调控。11、siRNA不参与生物生长，是RNAi的产物，原始作用是抑制转座子活性和病毒感染。 RNAi在哺乳动物中应用的具体设计策略1siRNA设计的原则1在预定沉默的mRNA中找到一段21nt的序列，起始是AA 2、一般在靶mRNA起始密码子下游100-200bp至翻译终止密码子上游100bp的范围内，其中AA(N19)TT是最理想的序列，若靶mRNA 中无此序列，亦可选用NA(N21)或NAR(N17)YNN(R表示嘌呤，Y表示嘧啶）3在19nt的RNA片段中不能含有连续4个T或A的区域4、通过BLAST确定片断的特异性。5、通过一个基因需要设计多个靶序列的siRNA，已找到最有效的siRNS序列。