万洋坐骨神经—腓肠肌标本的制作及刺激对肌肉收缩的影响.docVIP

坐骨神经—腓肠肌标本的制作及刺激对肌肉收缩的影响实验 水产一班 万洋 一、实验目的: 1、学习生理学实验基本的组织分离技术；学会制作蛙类坐骨神经—腓肠肌标本； 2、学习神经—肌肉实验的电刺激方法和记录肌肉收缩的方法；观察刺激强度与肌肉收缩之间的关系；掌握阈刺激、阈下刺激、阈上刺激、最适刺激等概念。 3、观察用不同频率的最适刺激刺激坐骨神经对腓肠肌收缩形式的影响及其特征。了解和掌握单收缩、复合收缩、强直收缩特征和形成的基本原理。 二、实验原理: 蛙类的一些基本的生理功能与恒温动物类似。将蛙的神经-肌肉标本放在任氏液中，兴奋性可保持几个小时。若给神经或肌肉一次适宜刺激，可在肌肉和神经上产生一个动作电位，肌肉收缩和舒张一次，表明神经和肌肉产生了一次兴奋。生理学实验常用蛙的坐骨神经-腓肠肌标本研究不同强度和频率的刺激和肌肉收缩的关系。 三、实验步骤： ㈠ 坐骨神经-腓肠肌标本的制备 1、破坏脑和脊髓 2、去除躯干上部、皮肤及内脏 3、剥离皮肤 一只手捏住脊柱的断端（注意不要捏住脊柱两侧的神经），另一只手捏住皮肤的边缘，向下剥掉全部后肢的皮肤，将标本放在盛有任氏液的玻璃器皿中。将手及使用过的全部器械冲洗干净。 4、分离双下肢 将标本提起，剪去向上突起的骶骨，然后沿正中线将脊柱剪为两半，并从耻骨联合处剪开两侧下肢，浸入盛有任氏液的培养皿中使用。 辨认蛙后肢主要肌肉，找出腓肠肌。 游离坐骨神经和腓肠肌 取一侧下肢固定于蛙板上，固定时，坐骨神经、腓肠肌向上，先用玻璃分针沿脊柱游离坐骨神经腹腔段，分离坐骨神经直至腘窝（不要伤及神经）；再用玻璃分针分离腓肠肌，并在肌腱上穿线结扎。 7、剪去其他不用的组织 在坐骨神经两端各留一块骨头和肌肉，以便于固定。 注意：剥离时一定要保持标本完整性；尽可能用玻璃分针，少用镊子，避免刺激神经。 8、标本检验 完整的标本应包括四部分：一段脊柱骨、坐骨神经、腓肠肌、一段股骨头。 用镊子轻轻提起结扎神经线，经任氏液沾湿的锌铜弓短暂轻触坐骨神经，如腓肠肌发生迅速的收缩反应，则表明机能完好。将标本置于任氏液中，稳定其兴奋性15－20 min，即可进行实验。 将坐骨神经-腓肠肌标本固定于蛙板上，把跟腱端的接线与张力换能器相连，调节高度与张弛度。 四、实验结果： 刺激频率对肌肉收缩的影响 ①：单收缩 ②：不完全强直收缩 ③：完全强直收缩 刺激强度对肌肉收缩的影响 五、实验结果分析： 刺激频率与肌肉收缩：在实验条件下，给予骨骼肌一次单刺激，可发生一次动作电位，随后产生一次简单迅速的收缩称为单收缩，包含潜伏期，收缩期和舒张期。蛙的坐骨神经肌肉标本单收缩的总时程为0.11s，潜伏期、缩短期共0.05s、舒张期0.06s。若给予标本相继的两个最适刺激，两次刺激的间隔大于肌肉收缩的总时程时，会出现单收缩；否则在上次收缩基础上继续收缩，称为复合收缩。若间隔小于总时程而长于肌肉收缩的潜伏期和缩短期时程，后一次刺激落在前一次刺激肌肉收缩的舒张期，则会导致一次收缩未完全舒张就再次收缩；若间隔小于收缩期，后一次刺激落在收缩的缩短期内，则会导致一次收缩正在收缩时又再次收缩，收缩的幅度高于单收缩的幅度。根据这个原理，给予标本一连串的合适频率的最适刺激，刺激频率不同会得到一连串的单收缩、不完全强直收缩或完全强直收缩的复合收缩。 刺激强度与肌肉收缩：神经—肌肉标本是由许多兴奋性不同的神经纤维和肌纤维组成，在保持足够的刺激时间不变时，刺激强度过小不能引起任何反应，这样的刺激称为阈下刺激；随着刺激强度增加到一定值，可引起少数兴奋性较高的运动单位兴奋少数肌纤维收缩，较小的张力变化，该刺激的强度为阈强度，该刺激为阈刺激。随着刺激强度的增大，较多的运动单位兴奋，肌肉收缩的幅度、长生的张力也增加，此刺激为阈上刺激。但刺激增大到一定值，所有的运动单位都兴奋，引起肌肉最大强度的收缩，产生的张力也最大，此后再增加刺激强度，也不会再引起反应的继续增加。可引起肌肉、神经最大反应的最小刺激强度称为最适刺激强度，该刺激称为最适刺激。