万孚rdt疟疾检测ppt课件.pptVIP

疟疾(malaira PF/PAN)快速检测试剂介绍 江苏省寄生虫病防治研究所 顾亚萍 一、疟疾检测方法学 二、万孚疟疾快速试剂介绍 三、注意事项及异常情况 疟疾相关检测方法 显微镜镜检 PCR检测仪 胶体金检测试剂 各检测方法优缺点比较 检测方法 优点 缺点 显微镜镜检技术 ·特异高； ·分期，计数，区分虫种； ·1小时内能完成诊断程序 ·密度低时易漏检（恶性疟）； ·费时、费力 PCR技术 ·敏感性和特异性（最高） ·能鉴定4种疟原虫 ·产物的污染易致假阳性；或操作不当易致假阴性; ·需特殊设备，不能用于现场； ·费时，成本高 RDT ·简便快速，适用性广 ·对于原虫密度小于100个疟原虫/μl血样本，出现漏检情况。 万浮 疟疾（PF/PAN） 抗原检测试剂介绍 原 理 利用胶体金免疫层析技术，采用双抗体夹心法检测抗原。 检测抗原为疟原虫乳酸脱氢酶（PLDH）。 产品为三线联检卡，可检测出疟原虫感染和区分恶性疟感染。 PAN，为泛疟原虫， 包括了疟疾4个型 PF，为恶性疟 性能指标 最低检出量：100 个疟原虫/μl 血 对不同原虫密度的检测结果研究如下： 原虫密度 （parasites/μl） 数量 阳性 阴性 灵敏度（%） 0～100 26 3 23 11.5 100～200 20 18 2 90.0 200～500 37 35 2 94.6 500 30 30 0 100 操作方法 样本收集 用全血来进行检测。 全血收集：采用抗凝管采血，或在采血管里先加入抗凝剂（抗凝剂种类可为肝素、EDTA、柠檬酸钠或草酸钾），将采集血样加入并摇匀备用。 指尖、耳垂末梢或静脉样本采集后立即使用； 检验步骤 1 测试前仔细阅读使用说明书，测试应在室温下进行. 2 沿铝箔袋切口部位撕开，取出试纸卡平放于台面上，并做好标记。 3 将5μl全血加入样本加样孔(A孔)中 ,再往稀释液加样孔(B孔)中滴加稀释液4滴(100 ～ 120μl)。 4. 15分钟内观察显示结果；30分钟后显示的结果无临床意义。 结果判读 注意事项及异常情况 一 注意事项 试剂 1.本品为一次性体外诊断试剂，过期产品请勿使用； 2.如试剂包装铝袋破损，干燥剂变红，建议不要使用； 实验和保存环境： 1. 应避免实验环境温度过低或过高； 2.低温保存的测试卡需要恢复至室温后再打开，以免吸潮； 3.试剂应保存在阴凉干燥的环境中； 4.不要混合使用来自不同批次的试条/试卡和裂解液。 5.当疟原虫密度很高时检测线很明显，质控线可能变得很弱，为正常结果。 二、异常情况--假阳性 对于个别情况导致的假阳性，可能为以下原因引起。 1 血液样本为高血脂、高血红蛋白、高度乳糜血等异常血样，可能会引起非特异性吸附，以致出现细线或假阳。 2 操作时，加样后应能自然流过膜部分，如样本在膜部位凝固，易导致误判假阳。 3 观察时间的延长，导致金标物质的持续释放，过量的抗原抗体造成假阳情况。 三、异常情况--假阴性 1. 检查试剂包装内干燥剂有无吸潮，试剂条质控线显色是否正常。 2.试剂应该保存于4-30℃,如放于冰箱保存，检测标本和试剂盒应复温再检测。 3. 如果样本中抗原含量少，因其反应时间较长，判读时间最好不要提前，应在15min后。 4. 注意，全血加样量和滴加稀释液的量，若全血量少，稀释液多，易导致低浓度阳性漏检。 四、异常情况--无效情况 1. 运输过程导致包装破损，试剂失效； 2. 操作失误，加样量少，或者加样位置出错； 3. 储存温度不当，导致试剂失效； 4. 标本处理不当； 5.试剂已过有效期。 谢 谢