方法验证杂质研究.pptVIP

化药质控分析方法验证和杂质研究 质控分析方法验证 质控分析方法验证 1. 方法验证的主要内容 验证内容： 专属性 线性 范围 准确度 精密度（重复性、中间精密度和重现性）、 检测限和定量限 耐用性 系统适用性 1. 方法验证的主要内容 专属性——方法不受杂质、降解物、辅料的影响，可正确鉴定被分析物 鉴别反应：仅被分析物呈正反应，阴性对照呈负反应，结构相似及组分中的有关化合物也呈负反应。 杂质检查：加入的杂质可与共存物质分离并被检出 与原理不同的可信方法比较；强制降解 含量测定：比较加入杂质或辅料前后的测定结果 与可信方法比较测定结果（强制降解样品） 空白对照应无干扰，主成分与各杂质峰 （该杂质峰与其他峰）R≥2 1. 方法验证的主要内容 专属性试验中需要注意的问题 波长的选择； 每次试验时必须运行空白样品； 试剂、玻璃容器、流动相和过滤介质可能会影响方法的专属性。 1. 方法验证的主要内容 线性——在设计的测定范围内，样品浓度与响应值呈线性关系 线性是定量测定的基础，设计定量测定的项目，如杂质定量检查、含量和溶出方法均需要验证其线性 可用同一贮备液精密稀释后配制，或分别精密称样配制。 1. 方法验证的主要内容 线性——在设计的测定范围内，样品浓度与响应值呈线性关系 含量测定：在80%-120%浓度范围内配制样品。（考虑含量浓度、含量均匀度浓度及溶出的浓度，实际操作采用20%-200%） 相关系数R≥0.998，Y轴截距在100%响应值的2%以内，RSD≤2.0% 杂质定量测定：在定量限至一定浓度范围内配制样品。（考虑实测该杂质的值） 相关系数R≥0.990，Y轴截距在100%响应值的25%以内, RSD≤10% 1. 方法验证的主要内容 范围——能达到一定准确度、精密度和线性的浓度区间，为规定值 涉及到定量测定的检测项目均需要对范围进行验证，如含量测定、含量均匀度、溶出度或释放度、杂质定量试验等。 分析方法的范围应根据具体分析方法以及对线性、准确度、精密度的结果和要求确定，无特殊要求时，通常采用以下标准： 1. 方法验证的主要内容 范围——能达到一定准确度、精密度和线性的浓度区间，为规定值 半成品或成品含量测试：80%-100%或更宽 含量均匀度：70%-130%，据剂型特点有差异 溶出度：限度的±20%，或下限的-20%至上限的+20% 定量杂质：规定限度的±20%，或采用峰面积归一化法与含量同测时，为杂质限度的-20%至含量上限的+20% 1. 方法验证的主要内容 准确度——方法测定结果与真实值或参考值的接近程度，用回收率表示 准确度是定量测定的必要条件，涉及到定量测定的检测项目均需要验证其准确度，如杂质定量测定、含量和溶出方法。 分析方法的准确度能够确保： 样品中的待测物全部溶解 待测物全部从检测器中检出 1. 方法验证的主要内容 准确度——方法测定结果与真实值或参考值的接近程度，用回收率表示 配制三个浓度下各三个样品，共九个样品平行两次测定 回收率：辅料+对照品 加样回收率：样品+对照品（扣除本底值） Q：制剂中某已知杂质的回收率如何测定？(含已知量被测物的各组分混合物) 含量测定：配制80%、100%和120%三个浓度。回收率在98.0%-102.0%之间，RSD ≤2.0% 定量杂质：配制浓度根据有关物质定量限和该杂限度。回收率在80%-120%之间（杂质浓度为定量限时放宽至70%-130%），RSD ≤10% 1. 方法验证的主要内容 准确度 原料药： 可用已知纯度的对照品或符合要求的原料药进行测定； 用本法所得结果与已建立准确度的另一方法测定的结果进行比较 1. 方法验证的主要内容 准确度 制剂： 用含已知量被测物的各组分混合物进行测定； 如不能得到制剂的全部组分，可向制剂中加入已知量的被测物进行测定（加样回收试验法） 用本法所得结果与已建立准确度的另一方法测定的结果进行比较 1. 方法验证的主要内容 准确度 杂质 ： 往样品中加入已知量的杂质进行测定； 若不可能得到某种杂质或降解产物，可把此方法的分析结果与另一已验证的或药典的分析方法获得的结果进行比较 。 1. 方法验证的主要内容 精密度——多次取样测定同一均质供试品所得结果间的接近程度 使用偏差d、标准偏差SD和相对标准偏差RSD表示 偏差 d=xi-x 测量值与平均值之差 标准偏差 相对标准偏差