药剂学第四章 复制PPT课件.ppt

* 4、DNA病毒的大分子合成： ±DNA 子代DNA 复制 早期mRNA 早期蛋白质（酶） 转录 翻译 晚期mRNA 晚期蛋白质 （病毒结构蛋白等） 翻译 转录 * ±DNA病毒 多数在细胞核内合成DNA，细胞质内合成病毒蛋白。 早期： 病毒DNA 依赖DNA的 RNA多聚酶 早期mRNA 转 译 早期蛋白 DNA多聚酶 脱氧胸腺嘧啶激酶 调控病毒基因组转录的酶 抑制宿主细胞生物合成的酶 药物作用的靶 * 晚期： 解链 正链DNA 负链DNA DNA多聚酶 子代DNA 转录 晚期mRNA 晚期蛋白 病毒衣壳蛋白 及其他结构蛋白 * 多数在细胞质内合成子代RNA及病毒蛋白。 （1）正单链RNA病毒（有mRNA功能） 正单链RNA 复制 子代RNA 结构蛋白（衣壳蛋白等） 非结构蛋白 （依赖RNA的 RNA多聚酶） 双链RNA （复制中间型） 药物作用的靶 5、 RNA病毒的合成： * （2）负单链RNA病毒（有依赖RNA的RNA多聚酶） 负单链RNA 依赖RNA的 RNA多聚酶 正单链RNA （有mRNA功能） 子代RNA 结构蛋白 （衣壳蛋白等） 双链RNA（复制中间型） 药物作用的靶 解链 * 6、逆转录病毒的合成 单链RNA 逆转录酶 RNA DNA （复制中间型） 进入细胞核 双链DNA 整合（前病毒） 子代病毒RNA 病毒mRNA 病毒蛋白质 肿瘤发生 药物作用的靶 * ? DNA进入细胞核 →→部分转录→→翻译蛋白与DNA结合 →→DNA复制→→再次转录翻译结构蛋白→→组装、释放 * ? DNA进入细胞核 →→dsDNA→→转录翻译早期蛋白 →→再次转录翻译结构蛋白→→依赖于衣壳蛋白的 ssDNA合成→→组装、释放 * * * * （1）SV40转录调控 T-抗原阻断早期启动子的转录，使其进入晚期表达 复制起始后，晚期启动子表达VP1、2、3 7、表达调控 * UAA 内含子1 内含子2 前体mRNA 剪接方式1：去除内含子1 剪接方式2：去除内含子2 T-mRNA t -mRNA T- 抗原 t-抗原 分布于核内：100 KD 分布于胞浆内：18 KD T - 抗原和t-抗原mRNA前体的不同剪接方式 UAA （2）表达的转录后调控 A、 选择性拼接（类似机制仅限于核内复制的病毒） * B、 选择性起始mRNA的翻译－－Yp329 ? 腺病毒基因组复制后期转录两个小RNA VA RNAⅠ VA RNAⅡ 二者具高度二级结构，不编码任何多肽 ? 病毒侵染细胞后刺激产生干扰素－－作用之一活 化 细胞蛋白激酶（已知的DAI或p68）－－对细胞 和病毒的翻译起始都有抑制作用 ? VA RNA I与激酶结合解除其对翻译的抑制－－－ 选择性起始腺病毒mRNA的翻译 * 五、病毒的装配与释放（ assembly and release ） 病毒大分子合成产生的结构组分以一定方式结合，组装成完整的子代病毒颗粒，这一复制阶段称为装配，又称为成熟。 释放是复制的病毒从宿主细胞中扩散出来的过程。 * 就是将合成的病毒各部件组装在一起成为成熟病毒粒子的过程。 壳体装配主要有两种方式： 自发装配：蛋白以类似结晶作用的方式自发装配 指导装配：非结构蛋白参加（瞬时功能的脚手架 蛋白、水解切割蛋白） 1、装配（assembly） * 噬菌体装配 DNA分子缩合——通过衣壳包裹DNA而形成头部——尾丝及尾部的其它部件独立装配完成—头部与尾部相结合——最后装上尾丝，至此，一个个成熟的形状、大小相同的噬菌体装配完成。 * TMV装配 * 2、释放（release） 裂解（Disintegration） ：naked virus cause the host cell lysis 出芽（Budding）：enveloped viruses 无包膜病毒：阻断或抑制细胞正常代谢，裂解细胞； 有包膜病毒：影响细胞功能及其正常代谢可致细胞死 亡；有些则形成细胞间桥或引起细胞融合 而致细胞损伤等。 * 裂解：多以裂解细胞的方式释放。 分泌：噬菌体穿出细胞，细胞并不裂解。 裂解释放 通常情况下，一个噬菌体通过五个复制过程（一次复制循环）能产生100-300个噬菌体。 大肠杆菌死亡并破裂，释放出里面的病毒，新一代病毒开始新的生命旅程。 * 3、组织培养优点 （1）便于纯化病毒； （2）可直接观察细胞变化（包括细胞出