上课：课题3--血红蛋白提取与分离.pptxVIP

蛋白质(protein)是生命的物质基础，是有机大分子，是构成细胞的基本有机物，是生命活动的主要承担者。没有蛋白质就没有生命。 机体中的每一个细胞和所有重要组成部分都有蛋白质参与。蛋白质占人体重量的16%~20%，即一个60kg重的成年人其体内约有蛋白质9.6~12kg。 人体内蛋白质的种类很多，性质、功能各异，但都是由20多种氨基酸(Amino acid)按不同比例组合而成的，并在体内不断进行代谢与更新。;血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要成分，负责运输O2和CO2;课题3 血红蛋白的提取和分离;一、基础知识 （一）蛋白质提取和分离的原理 （二）蛋白质提取和分离的方法 1、凝胶色谱法（分配色谱法） 2、电泳法 （三）缓冲溶液 二、实验操作——蛋白质的提取和分离; 根据蛋白质的物理化学性质差异： 1.分子的形状、大小 2.电荷性质和多少 3.溶解度 4.吸附性质 5.对其他分子亲和力 ;1、凝胶色谱法（分配色谱法） ;;2、电泳法; ;思考：影响蛋白质分子运动速度的因素;（3）常见电泳方法有哪些？;（三）缓冲溶液 ;二、实验操作－－实验步骤;血液;血液;二、实验操作－－实验步骤;1.洗 涤 红 细 胞;2.释放血红蛋白;;;纯化－－凝胶色谱法;注意：装填尽量紧密，降低颗粒间隙；无气泡；洗脱液不能断流。;3.样品的加入和洗脱;正确的加样操作是：1、不要触及并破坏凝胶面。 2、贴壁加样。3、使吸管管口沿管壁环绕移动。;讨论：;知识总结;例题: 红细胞含有大量的血红蛋白，红细胞的机能主要是血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带氧气或二氧化碳。我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，请回答下列有关问题： （1）血红蛋白提取和分离的程序可分为四步： 、 、 和 。 （2）实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。①加入柠檬酸钠的目的是 。 ②以上所述的过程即是样品处理，它包括 、 、收集血红蛋白溶液。;（3）收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析，这就是样品的粗分离。 ①透析的目的是 。 ②透析的原理是 。  （4）然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。 ①样品纯化的目的是 。②血红蛋白有什么特点: 这一特点对进行蛋白质的分离有什么意义？