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绪论 分子生物学 广义：从分子的形式来研究生物现象的学科 。 狭义：从分子水平理解生命活动，主要指遗传信息的传递（复制）、保持（损伤和修复）、基因的表达（转录和翻译）与调控。 DNA是遗传物质被证实 1944年，Avery O.T. 肺炎双球菌转化实验 1）DNA在原核生物中是遗传物质 1928 Griffith, 无毒菌株与杀死的有毒菌株混合，即可致病； 1944 Avery, 肺炎链球菌转化（transform）实验（DNA提取和转化） 2）T2 噬菌体的遗传物质被证明是DNA(捣碎实验)。 3）真核细胞通过DNA转染(transfection)获得新的表型 基因（gene）：能够表达和产生基因产物（蛋白质或RNA）DNA序列。可分为蛋白质基因和RNA基因；按功能可分为结构基因和调节基因。 基因组（genome）：一生物体内所有的基因。现一般指生物体内所有的DNA序列。 E.coli 的重要性:在实验室中容易操作 ;生长迅速，只要求简单的营养物质 ;能进行很多生理生化过程 ;E.coli是发现存在有性生殖的第一种细菌 第二章 提出双螺旋结构的依据 各种生物物理资料（DNA纤维中的水含量） X－ray衍射图谱（Rosalind Franklin 完成） 碱基比（ Chargaff 完成） 核酸的种类（ RNA、DNA） ① 核糖核酸（ribonucleic acid-RNA）: 转移RNA(transfer RNA-tRNA) 、信使RNA(messenger RNA-mRNA)、核糖体RNA（ribosomal RNA-rRNA） 小分子细胞核RNA（snRNA）、染色质RNA（chRNA）、反义RNA（antisense RNA）、双链RNA（dsRNA）、细胞质小RNA（scRNA）、具有催化活性的RNA（ribozyme）、各种病毒RNA ②脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid- DNA） 核酸的功能：DNA是主要的遗传物质（转化作用） 遗传信息的载体，负责遗传信息的 贮存和发布。 RNA的功能： 1.参与蛋白质的合成 rRNA(75-80%) tRNA(10-15%) mRNA(2-5%) 2.遗传物质 3.具有生物催化剂功能 核酸的元素组成有两个特点： 1. 一般不2. P含量较多，并且恒定（9%-10%）。 因此，实验室中用定磷法进行核酸的定量分析。（DNA9.9% 、RNA9.5%）含S。 核酸（DNA和RNA）是一种线性多聚核苷酸，它的基本结构单元是核苷酸。 核苷酸本身由核苷和磷酸组成 RNA的分子结构(RNA structure) RNA一级结构研究最多的是tRNA、rRNA以及一些小分子的RNA。组成RNA的核苷酸也是以3 ′-5 ′磷酸二酯键连接。 模型构建（Watson Crick 完成） RNA的高级结构特点：RNA是单链分子，因此，在RNA分子中，并不遵守碱基种类的数量比例关系，即分子中的嘌呤碱基总数不一定等于嘧啶碱基的总数。 RNA分子中，部分区域也能形成双螺旋结构（类似A-DNA双螺旋结构），不能形成双螺旋的部分，则形成突环。这种结构可以形象地称为“发夹型”结构或茎环结构。 超螺旋（supercoil/superhelix）---DNA的高级结构 定义： DNA的高级结构指DNA分子（双螺旋）通过扭曲和折叠所形成的特定构象。包括不同二级结构单元间、单链与二级结构单元间的相互作用以及DNA的拓扑特征。 超螺旋是DNA高级结构的主要形式。可分为正超螺旋和负超螺旋。 正超螺旋（positive supercoil）：DNA扭曲方向与双螺旋方向相同，形成正超螺旋（双链紧缠） 负超螺旋（negaive supercoil） DNA扭曲方向与双螺旋方向相反，形成正超螺旋（双链松缠） 两种超螺旋的自由能均高于松弛状态。 天然原核生物DNA都呈现哪一种超螺旋形式？为什么？ 天然原核生物呈现负超螺旋 DNA负超螺旋易于解链，在DNA复制、重组和转录等过程中都需要两条链解开，所以负超螺旋利于这些功能的实施。 在体外可形成正超螺旋，如加入溴化乙锭（EtBr，EB），可引入正超螺旋。 EB插入DNA碱基之间 EB 嵌入剂 双螺旋结构的特点: A与T，C与G配对，以氢键结合； 双链反向平行（以5’~3’为正方向），从两端看结构相同。 两条主链由脱氧核糖和3’-5’磷酸二酯键交互连接而成；碱基位于内侧 基本参数 直径：2.0 nm； 螺距：3.4 nm； 每匝 10 bp/10.5bp 每一碱基对比另一对沿轴旋转36° 大沟含较多信息，为复制，转录部位； 小沟具一定调节功能 三种DNA结构特性比较 A-DNA B-DNA（含水量92%）脱水后变形为A-DNA（含水7