Biolg微生物自动鉴定系统使用.ppt

BIOLOG自动微生物分析系统 BIOLOG公司简介 1984年，Barry Bochner博士和Donald Barnby创立 BIOLOG股份有限公司，公司位于美国加州北部Hayward高 新生物技术工业园内，是全球高新技术百强之一。 BIOLOG致力于微生物鉴定领域新技术新产品的开发、 生产和销售，1989年自Microlog问世以来至今，经过不断升 级，目前已经可鉴定包括细菌、酵母和丝状真菌在内2000 种以上的微生物，几乎涵盖了所有的人类、动物和植物病原 和食品及环境微生物。其独特的设计理念使其产品特别适合 于研究领域。 BIOLOG的产品在中国市场已有近10年的历史，国内已 有客户近100个。 鉴定原理 不同种类的微生物利用碳源具有特异性。 微生物在利用碳源进行新陈代谢时，产生的酶能使四唑类物质（如TV）发生颜色反应。 微生物利用碳源代谢，不断增殖，浊度也会发生改变。 Biolog基于以上原理建立了每种微生物的特征指纹图谱，即与微生物种类相对应的数据库。 检测时通过智能软件将待鉴定微生物的图谱与数据库参比，即可得出鉴定结果。 Biolog微生物分析系统的型号 ?Microlog 1 ?Microlog 2 ?Microlog 3(Microstation) ?Microstaton 3E ?Omnilog ?Omnilog Plus 鉴定步骤 分离纯化 鉴定步骤总览 说明 说明 TSI反应 厌氧菌说明 维护保养 获得准确结果的关键因素 操作过程实例 BIOLOG微生物鉴定操作步骤 BUG = BIOLOG UNIVERSAL GROWTH AGAR BUG琼脂培养基是一种通用的、高营养的用于培养好氧菌的琼脂培养基，其中强化了可提高微生物代谢活性的营养物质，以优化鉴定板的性能。 BIOLOG的好氧菌数据库建立时都是采用BUG培养基进行纯培养，故一定要用BUG培养基进行接种前的纯培养。 BUG + M = BUG琼脂加0.25%麦芽糖 7.66%疏基乙酸钠安培管 7.66% 疏基乙酸钠溶液由BIOLOG提供。用BUG＋M琼脂培养革兰氏阳性芽孢杆菌时需稀释使用。 疏基乙酸钠有利于革兰氏阳性芽孢杆菌在接种液中形成悬浊液。 STREAKERZ ? STICKS Streakerz是一要长6英寸(152mm)的木棒，顶端为锥 形。 Streakerz非常适合用于挑取菌落及干管分散技术。 TSA = 胰蛋白胨大豆琼脂 TSA可替代BUG琼脂，其中的蛋白胨是经胰酶处理大豆蛋白和酪蛋白。 TSA培养基中含5%的脱纤羊血，提供额外的营养。 革兰氏阴性/阳性接种液 (GN/GP-IF) GN/GP-IF接种液是经灭菌的溶液，它由各种组分组成，以保证微生物正常生长的渗透压，并使接种的微生物达到良好的乳化分散效果，以保证接种液的均一性。 每管含19mL接种液。 GP2 微孔鉴定板 GP2微孔板执行95种离散的代谢测试，用于鉴定和分析革兰氏阳性好氧菌。目前的这部分的数据库为341种。 每个孔都进行一种独特的基于四唑变化的氧化还原反应。 鉴定过程无需加任何其它试剂。 RESERVOIR 加样槽 V型加样槽用于方便的吸取制备好的菌悬液。 BIOLOG GP-Rod SB TURBIDITY STANDARD浊度标准液 GB－Rod SB浊度标准 液为28%T，管规格为 20 x 150 mm ，与浊度 计的检测孔相匹配。 8道电动连续移液器预设 有四个程序用于BIOLOG 的微生物鉴定。 150μl/well, multiple rows 150μl/well, single row 100μl/well, multiple rows 100μl/well, single row BIOLOG TURBIDIMETER（浊度计） 浊度计采用直流9V电压，由镍铬充电电池供电； 电池使用之前应充电12小时。 准备3mL无菌水 取一支灭菌的玻璃或塑料试管； 无菌条件下加3mL无菌水。 加疏基乙酸钠 加8滴疏基乙酸 钠溶液至3mL无菌水中。  摇匀。 涂布疏基乙酸钠溶液于平板上 制备 BUG + M + T平板的目的 晾干 晾干两分钟。 未晾干易使细菌扩散。 SECTION 3 挑取菌落 用木制接种棒挑取分离良好的单菌落。 芽孢菌的接种技术 在BUG + M + T 琼脂平板上划十字接种； 如果待接微生物容易扩展生长，仅需划单条的十字线。 接种后的琼脂平板外观 该接种技术的目的是在琼脂平板上中部形成一个窄十字交叉线； 芽孢杆菌在营养缺乏时易形成芽孢。划窄线的目的是保证充足的营养，避免形成芽孢。 不易生长的芽孢菌接种技术 如芽孢菌不易扩展生长，可在同一个方向上